代丽娟 郑唐春 刘彩霞 李开隆 曲冠证

(东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室，哈尔滨 150040)

* 通信作者：E-mail:quguanzheng@yahoo.com

拟南芥CYCD2;1基因植物表达载体的构建及在烟草中的遗传转化分析

代丽娟 郑唐春 刘彩霞 李开隆 曲冠证*

(东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室，哈尔滨 150040)

细胞分裂是生物的基本特征之一，在植物生长发育的过程中，发挥着极其重要的作用，细胞周期蛋白CYCD2;1基因作为一个调控因子，对调节细胞周期具有重要作用。本文以拟南芥细胞周期蛋白(AtCYCD2;1基因)作为研究对象，利用PCR技术从拟南芥花序cDNA扩增出AtCYCD2;1基因，构建植物表达载体(pROKII-AtCYCD2;1)并利用农杆菌介导的叶盘法转化野生型烟草。转基因植株的PCR检测结果表明，AtCYCD2;1基因已经整合到了烟草基因组中。在T2代植株中，通过实时定量荧光PCR检测显示，AtCYCD2;1在mRNA水平也均有表达。过量表达CYCD2;1的转基因烟草在花器官中存在明显表型，与野生型相比主要表现为转基因植株花冠宽度变大，花瓣和萼片长度变长，果实变大，上述结果表明AtCYCD2;1基因影响花的发育。

AtCYCD2;1；周期蛋白；遗传转化；烟草

植物D类周期蛋白(cyclin D,CYCD)控制着细胞周期的进程，在细胞的分裂增殖过程中起重要作用，它是调控有丝分裂的信号。此外，植物D型周期蛋白在G1期优先被分裂素刺激物诱导[1～2]。根据周期蛋白在细胞周期不同阶段发挥的作用，将其分为G1周期蛋白、S周期蛋白和G2周期蛋白[3]。CYCD在G1到S期过渡中起重要作用，故而又被称为G期特异性周期蛋白[4]。CYCD的作用主要是积累发育信号，控制细胞重新进入细胞周期[3,5～6]。……