高勇　李强　赵小磊　张娟丽　周静

1 河南省食品药品审评查验中心　（郑州　450004）

2 河南省医疗器械检验所　（郑州　450003）

麻醉面罩的体外细胞毒性试验研究

高勇1李强1赵小磊1张娟丽2周静2

1 河南省食品药品审评查验中心（郑州450004）

2 河南省医疗器械检验所（郑州450003）

麻醉面罩是医院手术室最常用的耗材之一，麻醉面罩的质量直接影响到患者全身麻醉的程度以及手术的质量，目前国内制造麻醉面罩的原材料主要是聚氯乙烯（PVC），本研究依据《ISO10993-5∶2009医疗器械生物学评价 体外细胞毒性试验》的要求，我们选择了浸提液法中的MTT比色试验和间接接触法中的琼脂扩散试验对麻醉面罩进行体外细胞毒性评价［1］。

1.试验材料与试剂

小鼠成纤维细胞L-929（购自中国科学院上海生命科学研究院细胞库），胎牛血清（Hyclone公司），胰蛋白酶（美国Thermo公司），MTT溶液（Sigma公司），RPMI1640培养基（Gibco公司），琼脂（Sigma公司），中性红（美国Amresco公司），麻醉面罩（来自生产企业送样），阴性对照为高密度聚乙烯，阳性对照为5%二甲基亚砜（DMSO）。

2.样品制备

在无菌条件下，按照3cm2/ml的浸提比例加入含10%胎牛血清的RPMI1640培养液，放置于37˚C的CO2细胞培养箱中孵育24h。阳性对照用5%二甲基亚砜（DMSO），阴性对照材料用高密度聚乙烯，称取高密度聚乙烯4g，按0.2g/mL的浸提比例加入含10%胎牛血清的RPMI1640培养基20mL，置于37˚C培养箱孵育24 h，分别取阴性对照、阳性对照及供试品浸提液用于MTT比色试验［2］；将麻醉面罩剪成直径为5mm的圆片，用于琼脂扩散试验。

3.试验方法

3.1四唑盐（MTT）比色法

取生长旺盛的小鼠成纤维细胞L929，用胰蛋白酶消化成……