龙嘉 李黎明 许翠 杨佳 蒋明军

518035深圳大学第一附属医院 深圳市第二人民医院皮肤科（龙嘉）；中国医学科学院 北京协和医学院 皮肤病研究所 江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室（李黎明、许翠、杨佳、蒋明军）

HPV16E7靶向小干扰RNA对SiHa细胞增殖凋亡及6种抑癌基因的影响

龙嘉 李黎明 许翠 杨佳 蒋明军

518035深圳大学第一附属医院 深圳市第二人民医院皮肤科（龙嘉）；中国医学科学院 北京协和医学院 皮肤病研究所 江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室（李黎明、许翠、杨佳、蒋明军）

目的探讨HPV16E7在SiHa细胞株中对抑癌基因（MT1G、NMES1、RRAD、SFRP1、SPARC、TFPI2）的表达及细胞增殖能力和凋亡水平的影响。方法SiHa细胞转染E7SiRNA 48 h后，qPCR检测E7及6种抑癌基因mRNA水平变化，CCK⁃8检测细胞增殖能力改变，流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果SiHa细胞转染后48 h，qPCR结果显示实验组E7 mRNA显著降低（0.25±0.036，P＜0.05）；6种抑癌基因的mRNA水平均显著增加（MT1G 1.403±0.190、NMES1 1.720±0.060、RRAD 1.390±0.160、SFRP1 1.493±0.120、SPARC 2.157±0.144、TFPI2 2.060±0.122，P＜0.05）。细胞增殖结果显示，与阴性对照组及空白组比较，实验组细胞增殖能力显著降低（0.554±0.130，P＜0.05），阴性对照组和空白组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。细胞凋亡结果提示，实验组细胞凋亡细胞频率为9.222%较阴性对照组（0.246%）及空白组（0.123%）明显增加（P＜0.05），空白组与阴性对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。结论HPV16导致细胞恶性转化过程中，E7可能通过抑制（MT1G、NMES1、RRAD、SFRP1、SPAR、TFPI2）6种抑癌基因的表达参与作用。

人乳头瘤病毒16；乳头瘤病毒E7蛋白质类；细胞增殖；细胞凋亡；SiRNA；抑癌基因

人乳头瘤病毒（HPV）在多种肿瘤发生发展过程中的作用已得到广泛认同。高危型HPV感染是受染细胞发生恶性转化的必要条件，其中＞50%的HPV相关肿瘤与HPV16相关，因此针对HPV16的研究最为广泛，E6/E7基因是发挥致癌作用的主要分子，E6/p53⁃E7/pRB路径是致病的重要机制之一。……