郭元晟，靳 鹏

（1.锡林郭勒职业学院，内蒙古 锡林浩特 026000；2.河北省滦平县农牧局，河北 滦平 068250）

酵母硒对乌珠穆沁羊免疫球蛋白及细胞因子的影响

郭元晟1，靳 鹏2

（1.锡林郭勒职业学院，内蒙古 锡林浩特 026000；2.河北省滦平县农牧局，河北 滦平 068250）

［目的］通过饲养试验研究日粮中添加酵母硒对乌珠穆沁羊免疫球蛋白及关键细胞因子的影响，为合理确定内蒙古锡林郭勒地区乌珠穆沁羊日粮中酵母硒的适宜添加量以及酵母硒在该地区肉羊养殖中的推广使用提供理论依据。［方法］采用单因子随机试验设计，将240只健康乌珠穆沁羯羊随机分成4组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组）。其中，Ⅰ组为对照组，日粮中添加无机硒（亚硒酸钠）0.3 mg/kg（DM基础），其他3组为酵母硒组，日粮中分别添加0.3、0.6、0.9 mg/kg（DM基础）的酵母硒。预饲期15 d，正饲期60 d。［结果］在日粮中添加酵母硒能够显著提高乌珠穆沁羊血清中免疫球蛋白IgM、IgG、IgA以及细胞因子IL-1、IL-2及IL-6的含量。［结论］在乌珠穆沁羊日粮中添加酵母硒能显著提高乌珠穆沁羊的免疫水平，综合饲养成本及免疫增强效果，以添加0.6 mg/kg（DM基础）效果最佳。

酵母硒；乌珠穆沁羊；免疫功能；细胞因子

牲畜的各种疾病给畜牧业生产带来巨大的经济损失。多年以来，人们通过在饲料中添加一定量的抗生素来减少牲畜疾病的发生。但是，随着使用抗生素添加剂的弊端逐渐被人们所认识，研究人员开始致力于开发安全可靠的饲料添加剂以提升动物的健康水平，从而提高动物生产性能。免疫球蛋白普遍存在于血液、组织液、外分泌液中，具有抗菌、抗病毒、激活补体等生物学功能，可以体现动物免疫功能的强弱。其中IgG、IgM、IgA是动物血清中重要的免疫球蛋白，具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤及中和毒素等作用［1］。 白细胞介素（interleukin，IL）是由免疫系统、造血系统或炎症反应中的活化细胞产生的细胞因子，对机体免疫应答、炎症反应、神经—内分泌效应等有重要的影响。白介素1（IL-1）来自激活的单核巨噬细胞、上皮细胞与内皮细胞，能促进T细胞的激活，是造血生长因子的辅助因子。白介素2（IL-2）由T细胞产生，可以引起T细胞增殖并维持T细胞在体外的持续生长，故称为T细胞生长因子。白介素6（IL-6）是机体为保持内环境稳定而分泌的一种多功能细胞因子，在B细胞生长分化时起关键作用，故称为B细胞生长因子。因此，血清免疫球蛋白及细胞因子水平是评价机体免疫功能的重要指标，可以反映机体的免疫功能状态［2］。大量研究证实，膳食或动物饲料中添加矿物质元素硒，对人或动物机体具有营养及免疫调节作用［3］。该研究旨在通过饲养试验研究日粮中添加酵母硒对乌珠穆沁羊免疫球蛋白及关键细胞因子的影响，为合理确定内蒙古锡林郭勒地区乌珠穆沁羊日粮中酵母硒的适宜添加量以及酵母硒在该地区肉羊养殖中的推广使用提供依据。

表1 基础日粮配方及营养水平

表2 乌珠穆沁羊血清中IgG含量测定结果 g/L

表3 乌珠穆沁羊血清中IgM含量测定结果 g/L

表4 乌珠穆沁羊血清中IgA含量测定结果 g/L

1 材料与方法

1.1 实验动物 5～6月龄的健康乌珠穆沁羊240只，体重相近。

1.2 试验设计 采用单因子随机试验设计，将240只健康乌珠穆沁羯羊随机分成4组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组），每组6个重复，每个重复10只。其中Ⅰ组为对照组，日粮中添加无机硒（亚硒酸钠）0.3 mg/kg（DM基础），其他3组为酵母硒组，日粮中分别添加0.3、0.6、0.9 mg/kg（DM 基础）的酵母硒。 预饲期 15 d，正饲期60 d。

1.3 饲养管理及试验日粮 实验羊只进栏前对羊舍进行全面消毒，预饲期间对羊只进行健康检查、驱虫、疫苗接种等。每天清扫圈舍，以保持圈内清洁，整个圈舍采取自然通风，所有圈舍进行不定期消毒。实验羊只由专人管理，试验期肉羊自由采食，自由饮水。试验日粮组成参照国内肉羊饲养标准NY/T 816-2004，并做适当调整，其配方及营养水平见表1。

1.4 样品采集 在正式试验第1、30、60天清晨，每组每个重复随机选取2只羊，每个处理组共12只，进行静脉采血，离心制备血清，置于-70℃超低温冰箱中冻存备用。

1.5 测定指标及方法 血清中IgG、IgM、IgA含量采用试剂盒法测定，试剂盒购自南京建成生物有限公司，具体操作按照说明书进行。血清中IL-1、IL-2及IL-6含量利用放免法测定。

1.6 数据处理 试验数据利用SAS 9.0软件中的One-way ANOVA统计程序进行统计分析。P＜0.05表示各处理间差异显著。

表5 乌珠穆沁羊血清中IL-1含量测定结果 ng/mL

表6 乌珠穆沁羊血清中IL-2含量测定结果 ng/mL

2 结果与分析

2.1 酵母硒对乌珠穆沁羊血清中IgG含量的影响由表2可知，添加无机硒和酵母硒对乌珠穆沁羊血清中IgG的含量均有不同程度的提高作用。在试验第30天和第60天时，Ⅲ组、Ⅳ组羊只血清中的IgG含量均显著高于Ⅰ组（P＜0.05），Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组之间差异不显著（P＞0.05），以添加剂量为0.6 mg/kg（DM基础）的Ⅲ组效果最好。

2.2 酵母硒对乌珠穆沁羊血清中IgM含量的影响由表3可知，添加无机硒和酵母硒对乌珠穆沁羊血清中IgM的含量均有不同程度的提高作用。在试验第30天时，Ⅲ组、Ⅳ组羊只血清中的IgM含量均显著高于Ⅰ组（P＜0.05），Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组之间差异不显著（P＞0.05）；在试验第60天时，3个酵母硒添加组羊只血清中的IgM含量均显著高于Ⅰ组 （P<0.05），Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组之间差异不显著（P＞0.05），以添加剂量为0.6 mg/kg（DM基础）的Ⅲ组效果最好。

2.3 酵母硒对乌珠穆沁羊血清中IgA含量的影响由表4可知，添加无机硒和酵母硒对乌珠穆沁羊血清中IgA的含量均有不同程度的提高作用。在试验第30天时，Ⅲ组羊只血清中的IgA含量显著高于Ⅰ组（P<0.05）；在试验第60天时，Ⅲ组、Ⅳ组羊只血清中的IgA含量均显著高于Ⅰ组 （P＜0.05），Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组之间差异不显著（P＞0.05），以添加剂量为0.6 mg/kg（DM基础）的Ⅲ组效果最好。

2.4 酵母硒对乌珠穆沁羊血清中IL-1含量的影响 由表5可知，添加无机硒和酵母硒对乌珠穆沁羊血清IL-1的含量均有不同程度的提高作用。在试验第30天和第60天时，Ⅲ组和Ⅳ组羊只血清中的IL-1含量均显著高于Ⅰ组（P＜0.05），Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组差异不显著（P＞0.05），以添加剂量为0.9 mg/kg（DM基础）的Ⅳ组效果最好。

2.5 酵母硒对乌珠穆沁羊血清中IL-2含量的影响 由表6可知，添加无机硒和酵母硒对乌珠穆沁羊血清IL-2的含量均有不同程度的提高作用。在试验第30天时，Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组羊只血清中的IL-2 含量均显著高于Ⅰ组（P＜0.05），Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组差异不显著（P＞0.05）；在试验第60天时，Ⅲ组和Ⅳ组羊只血清中的IL-2含量均显著高于Ⅰ组（P＜0.05），Ⅲ组和Ⅳ组差异不显著（P＞0.05），以添加剂量为0.6 mg/kg（DM基础）的Ⅲ组效果最好。

2.6 酵母硒对乌珠穆沁羊血清中IL-6含量的影响 由表7可知，添加无机硒和酵母硒对乌珠穆沁羊血清IL-6的含量均有不同程度的提高作用。在试验第30天和第60天时，3个酵母硒添加组羊只血清中的IL-6含量均显著高于Ⅰ组 （P＜0.05），Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组差异不显著（P＞0.05），以添加剂量为0.9 mg/kg（DM基础）的Ⅳ组效果最好。

表7 乌珠穆沁羊血清中IL-6含量测定结果 ng/mL

3 讨论

硒对动物机体的免疫调节有重要作用，其参与调节T淋巴细胞、B淋巴细胞及非特异性免疫效应细胞的功能。关于硒对反刍动物免疫机能的影响报道并不一致。黄志坚等［4］在奶牛饲料中添加富硒酵母，随着补硒天数的增加，补硒各组奶牛血液中淋巴细胞的转化能力和T淋巴细胞百分率显著增多。汪传松等［5］研究表明，引用人工硒茶5周后，外周血淋巴细胞转化率及IgM水平都有明显提高。雒国彬等［6］报道，随着酵母硒添加量的提高，奶牛血清IgM、IgG和IgA的含量呈先升高后降低的趋势。Swecker等［7］研究发现，奶牛补硒后可增加初乳及犊牛血清中的IgG水平，但对IgM无显著影响。王传蓉等［8］报道，补硒可使母牛分娩后12 h血清中的IgM、IgG含量显著提高，且IgA的含量也有所增加。He等［9］报道，补硒可以提高慢性肝炎病人外周血单核细胞分泌IL-2的能力。Safir等［10］研究表明，补硒可以促进巨噬细胞分泌IL-1和IL-6。倪丽丽［11］研究发现，在奶牛日粮中添加有机硒，可使其血清中的IgM、IgG、IgA、IL-1及IL-2含量显著提高。该研究结果显示，日粮中添加一定量的酵母硒能够显著提高乌珠穆沁羊血清中 IgM、IgG、IgA、IL-1、IL-2及IL-6的含量，这与前人大多数的研究结果是一致的。

4 结论

在乌珠穆沁羊日粮中添加酵母硒能显著提高乌珠穆沁羊的免疫水平，综合饲养成本及免疫增强效果，以添加量为0.6 mg/kg（DM基础）效果最佳。

［1］DYLEWSKI M L，MASTRO AM，PICCIANOM F.Matemal Se nutrition and neonatal immune system development［J］.Bio Neonate，2002，82：122-127.

［2］李淑芳，李英，张继东，等.米糠多糖对健康雏鸡外周血T淋巴细胞转化和体液免疫的影响［J］.动物营养学报，2007，19（3）：237-244.

［3］宋巴达玛.沙葱多糖对肉羊免疫机能和抗氧化作用的影响［D］.呼和浩特：内蒙古农业大学，2010.

［4］黄志坚，林藩平，邱承亮，等.不同硒源对奶牛抗氧化能力和免疫功能的影响［J］.湖南农业大学学报：自然科学版，2003，29（10）：16-20.

［5］汪传松，熊世洲.人工硒茶增强免疫功能的观察［J］.同济医科大学学报，1996，25（4）：327-328.

［6］雒国彬，赵洪波，文奇男，等.酵母硒对围产前期奶牛全血硒含量和血液抗氧化能力的影响［J］.中国饲料，2010（16）：34-36.

［7］SWECKER W S，THATCHER C D，EVERSOLE D E，et al.Effect of selenium supplementation on colostral IgG concentration in cows grazing selenium-deficient pastures and on postsuckle seurm IgG concentration in their calves［J］.Am J Vet Res，1995，56（4）：450-453.

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［11］倪丽丽.有机硒对奶牛瘤胃发酵、抗氧化功能及免疫功能的影响［D］.呼和浩特：内蒙古农业大学，2011.

Effect of Dietary Supplementation of Selenium-enriched Yeast on Immunoglobulin and Cytokine of Ujumqin Sheep

GUO Yuan-sheng1，JIN Peng2
（1.Xilingol Vocational College，Xilinhot 026000，China；2.Agricultural and Animal Husbandry Bureau of Luanping County of Hebei Province，Luanping 068250，China）

［Objective］ In order to rationally determine the optimal supplementation level of Selenium-enriched Yeast in diet of Ujumqin Sheep in Xilingol region of Inner Mongolia and to provide theoretical basis for the promotion and application of Selenium-enriched Yeast in local mutton sheep industry,the effect of dietary supplementation of Selenium-enriched yeast on immunoglobulin and key cytokine of Ujumqin Sheep was evaluated in this study. ［Methods］ The experiment was conducted by randomized design with a single factor.A total of 240 healthy wether of Ujumqin Sheep were included in this study and were randomly divided into 4 groups （Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ group）.The groupⅠwas served as control group,of which the diet was supplemented with 0.3 mg/kg of inorganic selenium （sodium selenite，DM basis）.The Ⅱ,Ⅲ and Ⅳ groups were served as experimental groups,of which the diet were supplemented with 0.3,0.6,0.9 mg/kg of Selenium-enriched Yeast （DM basis）.The pre-feeding period lasted for 15 d and the formal-feeding period lasted for 60 d. ［Results］ The serum content of IgM,IgG,IgA and IL-1,IL-2,IL-6 of Ujumqin Sheep were significantly increased when their diet was supplemented with Selenium-enriched yeast. ［Conclusion］ The dietary supplementation of Selenium-enriched yeast was able to enhance the immunity function of Ujumqin Sheep.In view of the feeding cost and immunopotentiation effect,supplementation level of 0.6 mg/kg Selenium-enriched yeast（DM basis） in diet was optimal and recommended.

Selenium-enriched yeast；Ujumqin Sheep；immunity function；cytokine

S816.72；S826.5

A文章顺序编号1672-5190（2016）03-0039-03

2016－01－24

郭元晟（1982—），男，讲师，博士，主要研究方向为动物营养与饲料科学。

（责任编辑：赵俊利）