PCR技术在肉类成分定量分析中的应用研究进展
2016-10-31王桂姬周广运任皓威夏秀芳
杨 艳,王桂姬,周广运,任皓威,夏秀芳,刘 宁
(东北农业大学食品学院,黑龙江哈尔滨 150030)
PCR技术在肉类成分定量分析中的应用研究进展
杨艳,王桂姬,周广运,任皓威,夏秀芳,刘宁*
(东北农业大学食品学院,黑龙江哈尔滨 150030)
PCR技术具有特异性强、灵敏度高、可同时分析大量样本的特点,在鉴别和定量分析食品中肉类成分上应用广泛。本文介绍了PCR扩增产物分析、实时荧光PCR和微滴数字PCR三种应用于肉类定量的技术,通过检出限、定量限和定量范围等数据分析这三种方法在肉类成分定量分析中的应用效果,并对其定量的局限性进行阐述,为进一步完善PCR定量技术提供参考。
PCR,肉类成分,定量,应用
肉类掺假一直受到社会各界的广泛关注,与肉类掺假相比,标签欺诈问题由于其极强的隐蔽性和难以确证性,并没有得到公众的足够重视。2014年和2015年,我国媒体相继曝出“牛丸”中几乎不含牛肉,“鱼丸”中鱼肉难寻的现象,而早在2009年就有学者提出,食品标签中肉类成分含量与食品本身存在高达20%的差异[1]。为了有效规范市场秩序、保障食品安全和消费者权益,人们提出了很多鉴别和定量肉类成分的分析方法,如色谱法[2]、质谱法[3]、免疫法[4]、蛋白质电泳[5]、核酸杂交[6]、电子鼻和电子舌[7]技术以及红外光谱法[8]等。以DNA为研究对象的PCR(Polymerize Chain Reaction)法以较高的敏感性和特异性,得到广泛的认可。
PCR是选择特定的寡核苷酸杂交目标DNA,在体外合成数以百万计的基因片段的方法。目前用于肉类鉴别的PCR方法有很多,如DNA扩增子的测序、PCR限制性酶切片段长度多态性分析、随机扩增多态性DNA分析、PCR单链构象多态性分析和巢式PCR等等[9-12]。……
