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人类白细胞介素-2与白细胞介素-7对体外诱导抗原肽SLYNTVAT 特异性T淋巴细胞的影响

2016-10-27朱建蒙

生物技术世界 2016年2期
关键词:检测

朱建蒙

(广西医科大学 广西南宁 530000)

人类白细胞介素-2与白细胞介素-7对体外诱导抗原肽SLYNTVAT 特异性T淋巴细胞的影响

朱建蒙

(广西医科大学 广西南宁 530000)

目的:优化人类白细胞介素-2(rhIL-2)与白细胞介素-7(rhIL-7)在体外诱导培养SLYNTVAT(SL9)抗原特异性T细胞时的用量。方法:分离健康人外周血PBMC作为效应细胞,培养T2(TAP缺陷T淋巴细胞)细胞并加载HIV来源抗原肽作为刺激细胞。SL9抗原肽四聚体检测不同细胞因子用量下特异性T细胞诱导频率大小。结论:rhIL-7在诱导SL9抗原特异性T细胞中起到关键促进作用,SL9 特异性T淋巴细胞能够自身分泌大量rhIL-2,减少rhIL-2用量可为体外诱导培养SL9特异性T淋巴细胞提高效率。

SLYNTVAT 特异性T淋巴细胞 白细胞介素

通过长期混合淋巴细胞培养的方法能够诱导出同种抗原肽-MHC特异性的T 细胞[1],肽四聚体技术目前被看做检测特异性CTL的金标准方法[2]。一般研究者体外诱导特异性CTL时均认为rhIL2在维持T细胞的生长增殖中起到重要作用,为诱导特异性CTL必不可少的细胞因子[3]。本研究通过加入不同量rhIL-2与rhIL-7进行混合淋巴细胞培养诱导SL9抗原特异性T细胞,构建SL9抗原肽四聚体并检测不同细胞因子用量下特异性T细胞诱导频率。证明rhIL-7在诱导SL9抗原特异性T细胞时起到更重要作用。

1 材料和方法

1.1 主要仪器与试剂

T2细胞购自于上海复祥生物科技有限公司,RPMI Medium 1640从Gibco公司购买,胎牛血清为Hyclone公司生产。PE标记链酶亲和素抗体购自于Sigma公司,生物素化MHC-SL9肽四聚体单体由北京旷博生物公司合成。PBMC来源于HLA-A2阳性志愿者外周血,无血清淋巴细胞培养基购自于照生公司,淋巴细胞分离液由索来宝公司提供。……

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