FPA与ELISA方法在我国部分地区牛布鲁菌病诊断应用中的比较研究
2016-10-24任燕斌孙翔翔李泽钦蔡家利范伟兴
任燕斌, 张 慧,孙翔翔,李泽钦 , 蔡家利, 范伟兴
FPA与ELISA方法在我国部分地区牛布鲁菌病诊断应用中的比较研究
任燕斌1,2, 张慧2,孙翔翔2,李泽钦3, 蔡家利1, 范伟兴2
目的评价荧光偏振试验(FPA)在我国部分地区临床牛血清样品检测中的应用。方法荧光偏振试验(FPA)检测1 286份牛血清样本,其中布病感染阳性血清309份,阴性血清977份,ROC曲线分析FPA临界值;荧光偏振试验(FPA)、间接ELISA(IELISA)及竞争ELISA(CELISA)同时检测1 160份牛血清样本,其中布病感染阳性血清231份,阴性血清929份,Kappa分析检测方法一致性。结果ROC曲线分析FPA最优临界值(cutoff)为95 mP,此时敏感性为100%,特异性为99.6%;比较FPA、IELISA、CELISA 3种方法,敏感性分别为97%、99.56%和98.27%,特异性分别为100%、98.06%和99.56%,同时3种方法一致性均≥0.75。结论FPA检测技术可以用于动物布病诊断,在田间条件下,快速、准确诊断布病,避免动物二次抓捕,适于推广应用。
布鲁菌病;FPA;IELISA;CELISA
动物布病常规血清学诊断方法包括凝集试验、补体结合试验以及酶联免疫吸附试验(ELISA)。目前我国国标采用RBT初筛,SAT定性的检测方法。RBT是凝集试验的一种,敏感性高,但特异性低,只能作为初筛试验,易受到试验温度、凝集时间和人为主观因素的影响;SAT检测的主要是IgM抗体,容易受到动物体内其它交叉反应细菌产生的IgM抗体的干扰,敏感性和特异性不高[1-3],且国外只用于羊血清的检测;补体结合试验(CFT)特异性高,但操作步骤繁琐、耗时;IELISA、CELISA是世界动物卫生组织(OIE)标准规定的布病检测国际贸易指定试验方法。其中IELISA[4]为筛选方法,其优势在于高敏感性,高通量,一般适用于初筛试验;CELISA采用牛种布鲁菌OPS表位之一的特异性单抗作为竞争抗体,其特异性高于IELISA[16],能有效避免交叉反应,同样有高通量的特点,一般作为确诊方法。……
