王丽 叶华 桑宏庆 王丹丹

摘要：建立了基于适配体的农药水胺硫磷和丙溴磷的荧光检测方法。采用可特异性识别水胺硫磷和丙溴磷、且5′ 端标记荧光基团FAM的核酸适配体（FssDNA），与3′ 末端标记猝灭基团DABCYL的短链序列（QssDNA）互补杂交形成双链结构，荧光基团的荧光被淬灭，荧光信号很弱；此时加入靶分子，特异性结合核酸适配体，引起互补短链序列从双链结构中解离，使适配体荧光信号增强，基于此可实现水胺硫磷、丙溴磷的定量检测。优化后的检测条件为：将终浓度为25 nmol/L FssDNA与50 nmol/L QssDNA在25℃孵育20 min，使二者杂交形成双链适配体探针复合物，加入等体积的农药样品孵育60 min，然后检测体系的荧光信号变化值ΔI。在最佳条件下，ΔI与水胺硫磷和丙溴磷的浓度均在50～500 μmol/L范围内呈线性关系。水胺硫磷的检出限（LOD，3σ）为11.4 μmol/L，相对标准偏差 （RSD）为5.8%（n=10）；丙溴磷的检出限为14.0 μmol/L，RSD为4.9%（n=10）。用于实际水样中两种农药的检测，加标回收率为85.8%～95.3%

关键词 ：核酸适配体； 荧光； 水胺硫磷； 丙溴磷

1 引 言

水胺硫磷（Isocarbophos）是一种速效广谱的有机磷杀虫剂，主要用于防治果树、水稻和棉花害虫，禁止用于果、茶、烟、菜、中草药植物，属于高毒农药，对人畜的危害很大，主要通过食道、皮肤和呼吸道引起中毒[1，2]。丙溴磷（Profenofos）是一种中等毒性的非内吸性广谱有机磷杀虫剂，具有触杀和胃毒作用，对棉花、果树、水稻、蔬菜等作物上的害虫有很好的防治效果[3，4]。我国规定在谷物中水胺硫磷最大残留限量为0.1 mg/kg，丙溴磷在柑橘和结球甘蓝中最大残留限量分别为0.2和0.5 mg/kg[5]。目前，水胺硫磷和丙溴磷的准确定量分析主要采用色谱法和色谱质谱联用法，这些方法灵敏度和准确度较好，但前处理复杂，需要昂贵的仪器以及专业人员操作，不适合基层分析实验室的推广应用。……