王波 周围 刘小花 柳小亚 陈亚丽 封士兰

摘要：建立了利用超高效合相色谱法（Ultra performance convergence chromatography，UPC2）快速分离和测定黄芪中5种主要黄酮类化合物（毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、美的紫檀素、芒柄花苷、芒柄花素）的方法。黄芪样品采用80%乙醇提取后，以超临界CO20.2% H3PO4甲醇溶液为流动相，梯度洗脱，色谱柱为Waters ACQUITY UPC2 CSH柱（100 mm × 3.0 mm，1.8 μm），柱温为40℃，流速为0.4 mL/min，进样量为1 μL，检测波长为280 nm。整个分析过程仅需15 min，分析速度是传统液相色谱的3倍以上。结果表明：毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、美的紫檀素、芒柄花苷与芒柄花素的检出限及定量限范围分别在0.3～0.5 mg/kg和1.0～2.0 mg/kg之间，5种黄酮类成分的加标平均回收率均高于99.7%，相对标准偏差（RSD）小于2.2%（n=6）；在最优条件下，对13批不同产地的黄芪进行检测，毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、美的紫檀素、芒柄花苷与芒柄花素的含量范围分别在4.8～102 mg/kg、14～277 mg/kg、0～135 mg/kg、5.3～119 mg/kg及2.8～41 mg/kg之间；本方法简便快速，重复性良好，结果准确可靠，可用于黄芪药材中5种主要黄酮类成分的含量测定。

关键词 ：超高效合相色谱； 黄酮类； 黄芪

1 引 言

超高效合相色谱法（Ultra performance convergence chromatography，UPC2）是超高效液相色谱（UPLC）和超临界流体色谱（Supercritical fluid chromatography，SFC）技术的结合，它以超临界流体二氧化碳为流动相主体，依靠流动相的溶剂化能力进行分离与分析[1，2]。相对于传统超临界流体色谱重复性较差的缺点，UPC2能够通过精确调节流动相强度、压力和温度，在整个分离过程中获得较好的重现性；此外，由于CO2超临界流体具有较高的线速度及较低的密度，在分离过程中具有很高的柱效，且分析速度快，灵敏度高，有机溶剂使用量少。……