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玉米ZmSUT4基因RNAi植物表达载体的构建

2016-10-20弓雪姜敏齐欣

江苏农业科学 2016年7期

弓雪 姜敏 齐欣

摘要:蔗糖转运蛋白(sucrose transporters,SUCs或SUTs)是蔗糖装载、卸载、分配的重要载体,ZmSUT4是玉米低亲和、高转运能力SUT4亚族的唯一成员。以黄早四ZmSUT4全长cDNA序列为模板,设计带有限制性内切酶位点的特异性引物,PCR扩增获得正向、反向2个片段,将反向、正向片段双酶切后依次插入pGreen-HY104植物表达载体中,从而构建由35S启动子调控的ZmSUT4基因RNA干扰(RNAi)的植物表达载体HY104-A-S,然后通过冻融法将载体质粒转入含有pSoup质粒的农杆菌EHA105中。ZmSUT4基因RNAi的植物表达载体的构建为研究ZmSUT4基因的功能奠定了基础。

关键词:玉米;ZmSUT4基因;RNAi植物表达;载体构建

中图分类号:S513.03;Q782 文献标志码: A 文章编号:1002-1302(2016)07-0042-03

玉米的籽粒产量主要取决于籽粒形成过程中成熟叶片(源)光合产物的生产、韧皮部的运输(流)以及在籽粒(库)中的积累。光合产物的分配运输是植物体内源、流、库相互协调的结果,源足、库大、流畅是高产的基础[1-2]。目前对源、库的特性研究较多,但是由于受研究方法和条件等限制,如对DNA序列了解的限制,对流的了解还相当不足。研究发现,随着种植密度增加,收获指数快速下降,表明在较高密度条件下,流对产量的限制作用在增加[3]。流包括韧皮部的装载、筛管中运输、韧皮部卸出和同化物的重新吸收。蔗糖作为高等植物光合同化物运输的主要形式,也是联系源库之间主要的糖类[4]。细胞膜上的蔗糖转运蛋白(sucrose transporters,SUCs或SUTs)承担着蔗糖从源细胞的外运、韧皮部的装载和卸载,以及向库细胞的装入功能,从而影响蔗糖的运输方向、速率和分配,其基因表达受多种环境因子的调控。……

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