汪艳艳，李海霞，巫亚俊，赵修南，麻　浩，刘坤璐，武军华，单俊杰，王玉霞，王海南（1.贵州大学药学院，贵州贵阳 55005；.军事医学科学院毒物药物研究所，北京 100850；3.国家食品药品监督管理总局，北京100053）

怀牛膝果寡糖对H1N1流感疫苗佐剂活性及免疫细胞功能的影响

汪艳艳1，2，，李海霞2，巫亚俊2，赵修南2，麻浩2，刘坤璐2，武军华2，单俊杰2，王玉霞2，王海南1，3
（1.贵州大学药学院，贵州贵阳 550025；2.军事医学科学院毒物药物研究所，北京 100850；3.国家食品药品监督管理总局，北京100053）

目的 研究牛膝果寡糖ABP-50-FOS对H1N1流感疫苗的佐剂活性及免疫细胞功能的影响。方法 采用凝胶渗透色谱、毛细管电泳、红外光谱和核磁共振等方法研究ABP-50-FOS的理化性质；BALB/c小鼠肌肉注射H1N1流感疫苗3 μg和ABP-50-FOS 200 μg初次免疫，28 d后加强免疫。分别于初次和再次免疫后14 d用ELISA法检测小鼠血清特异性IgG，IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3和IgM抗体水平；流式细胞仪测定脾细胞中CD3+，CD19+，CD4+和CD8+淋巴细胞亚群百分率；MTT法测定小鼠脾细胞增殖活性；ELISA法测定脾细胞培养上清干扰素γ（IFN-γ）、胸腺细胞培养上清白细胞介素4（IL-4）、腹腔巨噬细胞培养上清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和一氧化氮及小鼠骨髓细胞和DC2.4树突状细胞培养上清IL-12p70含量。结果ABP-50-FOS是一种果寡糖，峰高分子质量为1885 u，骨架结构为1，2-连接和1，6-连接的果糖。该寡糖能明显升高H1N1流感疫苗免疫小鼠血清特异性IgG，IgG2a和IgM抗体水平（P＜0.01），提高免疫小鼠脾CD3+，CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群的百分率。体外实验表明，ABP-50-FOS能促进小鼠脾细胞增殖反应和IFN-γ分泌（P＜0.01），促进胸腺细胞IL-4分泌（P＜0.01），刺激腹腔巨噬细胞分泌TNF-α（P＜0.01）和DC2.4树突状细胞分泌IL-12p70（P＜0.01），对巨噬细胞一氧化氮的分泌有抑制作用。……