生秀梅， 王正新



BTG2基因重组慢病毒载体的构建及其在肺癌A549细胞中的表达与功能

生秀梅， 王正新

目的构建重组慢病毒载体pCDH-BTG2，并检测其转染肺癌A549细胞后的表达与功能。方法通过PCR技术以含B细胞转位基因(BTG2)的cDNA克隆质粒(HsCD00330081)为模板获得BTG2基因片段，将此片段克隆至慢病毒载体pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro，形成pCDH-BTG2，转染PC3细胞检测BTG2的表达；将重组慢病毒载体质粒pCDH-BTG2包装成重组慢病毒颗粒，感染肺癌A549细胞后，通过蛋白免疫印迹法检测 BTG2的表达，细胞计数法检测BTG2对A549细胞生长的影响。结果pCDH-BTG2重组质粒构建成功，转染PC3细胞后可检测BTG2蛋白的表达，pCDH-BTG2包装成慢病毒感染A549细胞后，显著抑制A549细胞的生长。结论成功构建了重组慢病毒载体pCDH-BTG2，并发现BTG2抑制A549细胞的生长，为研究BTG2的功能奠定了基础，同时为肺癌的药物研究提供了靶点。

慢病毒属； 基因； 基因表达； 肺肿瘤； 肿瘤细胞，培养的； 重组，遗传

肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其恶性程度高，每年有近140万的死亡病例，目前治疗仍以手术为主，预后差，生存期短，因此尽快找到新的诊疗方法或研制出新的诊疗试剂显得尤为迫切[1-2]。本室前期工作中发现在肺癌A549细胞中沉默原癌基因p44的表达后，B细胞转位基因(B-cell translocation gene 2, BTG2)的表达显著上调。BTG2是抗细胞增殖TOB/BTG基因家族的成员之一，主要参与细胞分化、发育、凋亡、肿瘤细胞抑制等生理病理过程，被认为是一种新的抑癌基因[3-5]。本研究利用基因重组技术构建携带有BTG2基因的重组慢病毒载体，包装慢病毒颗粒，感染A549细胞，观察BTG2基因在肺癌A549细胞中的表达及其对A549细胞生长的影响，为进一步研究BTG2在肺癌的发生发展及在p44通路中的作用奠定基础。……