袁志军　秦　云



急性白血病患者血清及脑脊液中基质细胞衍生因子-1α的含量及其意义

袁志军秦云

目的检测急性白血病患者血清及脑脊液中的SDF-1α含量，分析其在不同分型的急性白血病中的变化及其临床意义。方法选择急性白血病患者作为实验组，同期以颅脑外伤患者作为对照组。实验组采用标准方案化疗2周期。采集2组患者治疗前后的静脉血及脑脊液标本，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测入组患者血清及脑脊液中的SDF-1α含量。结果治疗2周期后，实验组患者血清及脑脊液SDF-1α含量均低于治疗前(P<0.05)。治疗前后实验组与对照组比较，血清及脑脊液SDF-1α含量均明显升高(P<0.05)。与AML组比较，ALL组在治疗前后的血清及脑脊液SDF-1α含量较高；与非CNSL患者比较，CNSL组SDF-1α含量升高(P<0.05)。治疗2周期后，疗效为CR的患者SDF-1α含量较NR患者明显降低(P<0.05)。结论SDF-1α与急性白血病的中枢神经系统浸润有关，在血清及脑脊液中含量变化可作为病情严重程度评估及预后判断的指标。

急性白血病；血清；脑脊液；基质细胞衍生因子-1α

(The Practical Journal of Cancer,2016,31:1250～1252)

基质衍生因子-1α(SDF-1α)属于趋化因子家族，是一种趋化因子，由骨髓基质细胞产生[1]。研究表明，SDF-1α能够增加急性白血病细胞对化疗药物的耐受，增加了耐药细胞株，促进了急性白血病细胞的增殖、迁移[2]。本研究采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测急性白血病患者血清及脑脊液中的SDF-1α含量，分析其在急性白血病中的变化及临床意义。

1　材料与方法

1.1一般资料

选择于2014年1月到2015年1月在我院血液科住院的急性白血病患者50例，其中男性25例，女性25例，年龄15～71岁，平均年龄(51.32±11.6)岁。选择同期在我院住院的颅脑外伤患者20例作为对照组，其中男性10例，女性10例，年龄14～70岁，平均年龄(49.67±10.1)岁。2组患者在性别、年龄等方面比较，差异无统计学意义(P<0.05)，具有可比性。血象正常、无血液系统及免疫系统疾病。

1.2入组标准

按照WHO髓系和淋巴肿瘤分类法确诊，急性白血病分为急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性髓性白血病(AML)，其中，ALL共22例，包括L1 15例，L2 7例；AML共28例，包括M1 5例，M2 13例，M3 5例，M4 2例，M5 3例。中枢神经系统白血病(CNSL)共有12例，非中枢神经系统白血病(NCNSL)有38例。

1.3化疗方案

ALL患者采用VDLP、CODP方案静脉化疗；AML患者采用DA、MA方案静脉化疗；CNSL患者采用甲氨喋呤、阿糖胞苷、地塞米松鞘内化疗。

2周期化疗后评价疗效，有31例完全缓解(CR)，其中ALL 11 例，AML 20例，19例患者未缓解(NR)，其中ALL 4例，AML 15例。CNSL组患者6例脑脊液幼稚细胞转为阴性。

1.4标本采集

入组患者分别在治疗前、2个周期化疗后采集空腹外周静脉血2 ml，无菌管收集患者脑脊液1 ml，室温下静置20 min，台式离心机进行离心，转速调整为2 500 r/min，离心20 min，收集上清液，置于EP管中，于-80 ℃冰箱保存备用。

1.5酶联免疫吸附法检测血清及脑脊液中SDF-1α的含量

计算出需要的板孔数；试剂盒室温下放置30 min；配制5个浓度标准品，进行标准品稀释；每个浓度设复孔，加样；配液；洗涤；显色；终止；酶标仪以空白孔为标准调零，450 nm波长处测量各孔吸光值；依据配制的标准品浓度及对应OD值绘制线性回归方程，计算样品浓度。

1.6数据处理

采用SPSS17.0统计学软件进行数据处理，以均数±标准差表示，计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1ELISA法检测ALL、AML患者治疗前后血清及脑脊液中SDF-1α含量

治疗2周期后，ALL、AML组患者血清及脑脊液SDF-1α含量均低于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)；与对照组比较，ALL、AML组患者治疗前后血清及脑脊液SDF-1α含量均明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与AML组比较，ALL组在治疗前后的血清及脑脊液SDF-1α含量均较高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1　治疗前后各组患者血清及脑脊液中SDF-1α含量比较

注：*为与治疗前比较，差异有统计学意义，P<0.05；#为与对照组比较，差异有统计学意义，P<0.05；&为与AML组比较，差异有统计学意义，P<0.05。

2.2ELISA法检测CNSL、非CNSL患者治疗前后血清及脑脊液中SDF-1α含量

治疗2周期后，CNSL、非CNSL组患者血清及脑脊液SDF-1α含量均低于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)；与对照组比较，CNSL、非CNSL组患者治疗前后血清及脑脊液SDF-1α含量均明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与非CNSL组比较，CNSL组在治疗前后的血清及脑脊液SDF-1α含量均较高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2　CNSL、非CNSL患者治疗前后及对照组患者血清及脑脊液中SDF-1α的含量

注：*为与化疗前比较，差异有统计学意义，P<0.05；#为与对照组比较，差异有统计学意义，P<0.05；&为与非CNSL组比较，差异有统计学意义，P<0.05。

2.3ELISA法检测入组患者2周期治疗后不同疗效患者血清及脑脊液中SDF-1α含量

ELISA法对入组患者进行2周期治疗后血清及脑脊液中SDF-1α含量进行检测，结果发现，CR组31例，血清SDF-1(1657.84±398.13)mmol/l，脑脊液(1836.57±374.79)mmol/l，明显低于NR组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3　2周期治疗后不同疗效患者血清及脑脊液中SDF-1α含量

注：*为与NR组比较，差异有统计学意义，P<0.05。

3　讨论

白血病是最常见的血液系统恶性肿瘤，由造血干细胞突变引起，属于异质性恶性克隆性疾病。CNS是髓外白血病的最常见部位，常导致患者死亡，主要由于骨髓复发[3]。有文献报道称，CNSL的发生与血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶等众多细胞因子密切相关[4]。SDF-1α定位于人体第10号染色体长臂，有多种化学作用，其受体CXCR4定位于人体第4号染色体，为G蛋白耦联受体，可在多种肿瘤细胞，包括白血病细胞高度表达[5]。SDF-1α与白血病细胞的增殖、浸润密切相关，其表达水平增高可导致白血病细胞增殖失控、分化障碍、凋亡受阻，白血病细胞发生迁移、浸润、转移，促进白血病的发生、发展，此外，其表达升高还会引起白血病细胞对多种化疗药物的耐药[6]。

本研究选择在我院血液科住院的急性白血病患者，对其进行分型，对其进行标准方案化疗，于治疗前后采集其外周静脉血及脑脊液标本，采用ELISA法检测入组患者血清、脑脊液中SDF-1α含量，结果发现，治疗2周期后ALL、AML患者血清及脑脊液SDF-1α含量均低于治疗前；治疗前后与对照组比较，ALL、AML、患者血清及脑脊液SDF-1α含量均明显升高；与AML组比较，ALL组在治疗前后的血清及脑脊液SDF-1α含量均较高。研究表明，CXCR4在ALL患者白血病细胞高表达，其配体SDF-1α会趋化B-ALL细胞选择性停留，其趋化能力的高低与CXCR4的表达水平正相关[7]。这说明SDF-1参与了ALL细胞的迁移、浸润过程。既往研究检测急性白血病患者外周血中SDF-1α的含量，ALL明显升高，其表达水平与病情变化有相关性[8-9]。这与本研究的结果是一致的。

本实验对CNSL、非CNSL患者在治疗前后血清及脑脊液中SDF-1α含量进行检测，发现治疗后，CNSL患者血清及脑脊液SDF-1α含量高于非CNSL；较治疗前降低，但较对照组明显升高。这提示SDF-1α与CNSL发生发展有关，可能作为早期预测、早期诊断CNSL发生、评价CNSL预后的指标，其表达水平升高，可能是急性白血病患者出现中枢神经系统浸润、髓外脏器不均衡浸润发生的原因。

对入组患者治疗2周期后进行疗效评价，并检测CR、NR患者血清及脑脊液中SDF-1α含量，发现CR患者SDF-1α含量明显降低，这提示，SDF-1α含量可能与急性白血病病情的严重程度及预后密切相关[9]。

综上所述，SDF-1α作为白血病治疗的新靶点，与急性白血病的中枢神经系统浸润有关，在血清及脑脊液中含量变化可作为病情严重程度评估及预后判断的指标。抑制SDF-1α在白血病细胞中的表达，可能在一定程度上抑制白血病细胞的增殖、迁移、髓外浸润，并在避免化疗药物耐药方面起重要作用，但其具体机制有待进一步研究。

[1]章大谦，吴广胜.急性白血病患者血清、脑脊液趋化因子SDF-1测定及意义〔J〕.现代生物医学进展，2010，10(3)：544-546.

[2]Guang LG，Boskey AL，Zhu W.Regulatory role of stromal cell-derived factor-1 in bone morphogenetic protein-2-induced chondrogenic differentiation in vitro〔J〕.Int J Biochem Cell Biol，2012，44(11)：1825-1833.

[3]刘雪梅.HAG方案联合中药治疗老年急性白血病21例临床观察〔J〕.实用癌症杂志，2012，27(2)：200-201.

[4]Scorsone K，Blaney S，Bomgaars L，et al.Matrix metalloproteinases and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in the cerebrospinal fluid of children with central nervous system malignancies〔J〕.Cancer Res，2004，64(7)：419.

[5]许莲蓉，冯江芳，胥显民，等.健康人外周血树突状细胞的体外诱导及其功能分析〔J〕.白血病·淋巴瘤，2011，20(8)：482-485.

[6]Tavor S，Petit I.Can inhibition of the SDF-1 /CXCR4 axis eradicate acute leukemia〔J〕.Semin Cancer Biol，2010，20(3)：178-185.

[7]Parameswaran R，Yu M，Lim M，et al.Combination of drug therapy in acute lymphoblastic leukemia with a CXCR4 antagonist〔J〕.Leukemia，2011，25(8)：1314-1323.

[8]王树辉.急性白血病患者血清及脑脊液基质细胞衍生因子-1α的表达水平及意义〔J〕.中国老年学杂志，2012，32(20)：4390-4391.

[9]张曦，王占聚，崔为发，等.急性白血病患者血清及脑脊液中SDF-1α的检测及其临床意义〔J〕.当代医学，2011，17(8)：48-49.

(编辑：甘艳)

SDF-1α in Serum and Cerebrospinal Fluid of Acute Leukemia Patients and Its Significance

YUAN Zhijun，QIN Yun.

Xiaogan Central Hospital，Xiaogan，432000

ObjectiveTo detect SDF-1α in serum and cerebrospinal fluid of acute leukemia patients，and analyze its change in different classification of acute leukemia and clinical significance.MethodsPatients with acute leukemia was the experimental group，at the same time craniocerebral trauma patients was control group.The experimental group received 2 cycles of chemotherapy with a standard solution.Venous blood and cerebrospinal fluid specimens were collected in the 2 groups before and after treatment，and SDF-1α content in serum and cerebrospinal fluid were detected using enzyme-linked immunosorbent (ELISA).Resultsafter 2 cycles，serum and cerebrospinal fluid SDF-1α levels in the experimental group were lower than before treatment(P<0.05)；Before and after treatment compared with the control group，serum and cerebrospinal fluid SDF-1α levels in the experimental group were significantly higher(P<0.05)；Compared with AML group，serum and cerebrospinal fluid SDF-1α content in ALL group before and after treatment was higher，compared non-CNSL，contents of SDF-1αin CNSL increased(P<0.05)；after 2 cycles，the SDF-1α content in CR patients was significantly lower than NR group (P<0.05).ConclusionSDF-1α is associated with the central nervous system infiltration of acute leukemia，content changes in serum and cerebrospinal fluid can be used as indicators to illness severity evaluation and prognosis.

Acute leukemia；Serum；Cerebrospinal fluid；SDF-1α

432000 湖北省孝感市中心医院

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.08.010

R733.71

A

1001-5930(2016)08-1250-03

2015-09-23

2016-06-25)