□ 吴佳佳　瑞安市食品检验检测中心

高效液相色谱法测定糕点中丙酸钠、丙酸钙的不确定度评定

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材料与方法

（1）检验依据：《食品中丙酸钠、丙酸钙的测定高效液相色谱法》（GB/ T 23382-2009）。

（2）检验仪器：高效液相色谱仪Varian920/940-LC二极管阵列检测器。色谱条件：色谱柱C18 4.6 mm×250 mm 5μm不锈钢柱；流动相为1.5 g/ L磷酸氢二铵溶液，用1 mol/L磷酸溶液调pH2.7~3.5（使用时配制），经0.45 μm微孔滤膜过滤；流速1.0 mL/ min；柱温25℃；进样量20 μL；波长214 nm

（3）试剂:丙酸标准样品。

（4）样品处理：称取5 g样品在容量瓶中，20 mL和0.5 mL 1mol/L磷酸溶液，进行超声，用1mol/L磷酸溶液调pH为3，用超纯水定容，经0.45 μm微孔滤膜过滤后进行测定。

（5）标准溶液配制。称取丙酸0.05 g，用超纯水定容至25 mL。

数学模型

X——样品中丙酸的含量，g/kg；C0——标准使用液的浓度，mg/mL；

A1——样品中丙酸的峰面积mv·s；m——样品的重量，g；

V——样品定容体积，mL；A0——丙酸标准使用液的色谱峰面积,mv·s。

计算标准不确定度各分量

标准曲线拟合的不确定度U1rel

空白和标准系列分别做一个平行，空白调零，它包含了峰面积重复测量产生的不确定度，仪器数据处理系统引入的不确定度和标准溶液进样量及曲线拟合相关性不确定度，测定结果见表1。

用最小二乘法拟合直线，利用线性回归方程求出曲线y=0.2897x-0.0915，a=-0.0915，b=0.2879,峰面积标准偏差：

表1　标准曲线拟合相关数据

测量时，被测样品测量两次，故p=2，设平均值为Xpj，根据吸光度平均值测得样品溶液中最佳丙酸含量Xpred=3.02 g/kg。

相对标准不确定度：

U1rel=0.001406/3.02=0.000486

标准物质的相对不确定度U2rel

丙酸标准样品（纯度98.3%），从标准物质证书上查得相对扩展不确定度为1.0%，k=2，U2rel=1.0%/2=0.0050。

标准样……