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应用正交设计筛选小叶章诱导培养基的配方

2016-09-15张玉冷海楠徐明怡倪红伟王丽媛黑龙江省科学院自然与生态研究所湿地与生态保育国家地方联合工程实验室哈尔滨150040

国土与自然资源研究 2016年2期
关键词:设计

张玉,冷海楠,徐明怡,倪红伟,王丽媛(黑龙江省科学院自然与生态研究所湿地与生态保育国家地方联合工程实验室,哈尔滨150040)

应用正交设计筛选小叶章诱导培养基的配方

张玉,冷海楠,徐明怡,倪红伟*,王丽媛
(黑龙江省科学院自然与生态研究所湿地与生态保育国家地方联合工程实验室,哈尔滨150040)

以小叶章的茎段作外植体,采用正交设计法,考察6-BA、TDZ、NAA三种激素对小叶章初代培养产生的影响,确定适宜的激素种类及水平,优化筛选出适宜小叶章的诱导培养基.研究表明,激素6-BA是茎段诱导的关键因素;适宜小叶章初代培养的培养基配方为:1/2MS+6-BA0.5 mg·L-1+ TDZ0.1mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1。

小叶章;正交设计;诱导培养基

小叶章(CalamagrostisangustifoliaKom.)又名苫房草,是禾本科拂子茅属多年生根茎型草本植物,在我国主要分布于东北、华北、内蒙古等地区的平原低洼湿地,是三江平原典型草甸、沼泽化草甸的建群植物和优势植物[1-4]。近年来,小叶章的种群受到严重的破坏,生态功能下降。而无性繁殖是种群扩繁的常用方法。尤其通过组织培养方法不仅可以克服种子繁殖中存在的问题,而且可以克服扦插繁殖速度慢、繁殖率低的缺点[5]。因此利用组织培养技术,建立完整的小叶章组培快繁体系,显得尤为重要。

1 材料与方法

1.1试验材料

试验于2015年6月至2015年12月在黑龙江省科学院自然与生态研究所分子生物学实验室进行。选取当年新生无病虫害、生长健壮的幼嫩茎段作为外植体。

1.2试验方法

1.2.1培养基条件

以MS为基本培养基,添加蔗糖30g·L-1和琼脂6 g·L-1,调整pH值为5.5-5.8,配制分装后于121℃灭菌20 min。……

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