孙笑竹，吕春伟，秦　云，韩建翠，王毅刚

(浙江理工大学生命科学学院，杭州 310018)



CDK抑制剂SNS-032联合AD55-Apoptin对肝癌细胞Huh-7的体外抗癌作用

孙笑竹，吕春伟，秦云，韩建翠，王毅刚

(浙江理工大学生命科学学院，杭州 310018)

通过CDK抑制剂SNS-032联合AD55-Apoptin处理肝癌Huh-7细胞，以探究两者联合作用的体外抗癌作用。采用MTT法分别检测SNS-032、AD55-Apoptin以及SNS-032与AD55-Apoptin联合对肝癌细胞株Huh-7生长的抑制作用；利用Hoechst33342染色观察所处理细胞的凋亡形态学变化，采用流式细胞术对凋亡进行量化，Western Blot检测凋亡相关蛋白表达情况。结果表明：10MOI的AD55-Apoptin联合100ng/mL的SNS-032处理96h后，Huh-7细胞的存活率仅为4%，而10 MOI的AD55-Apoptin和100ng/mL SNS-032分别单独处理后细胞存活率为60%和8%(P<0.05)；Hoechst33342染色、流式检测及Western Blot结果表明，联合处理组细胞凋亡现象更明显。实验结果证明SNS-032联合AD55-Apoptin能有效的抑制肝癌细胞Huh-7生长，并诱导其凋亡。

CDK抑制剂(SNS-032)；AD55-Apoptin；肝癌；体外；抗癌作用

0　引　言

抗肿瘤研究的难点是如何找到一种治疗手段，在杀伤癌症细胞的同时，对正常组织产生的影响尽量小。然而，常用的放化疗手段都会对正常机体产生很大的毒副反应，因此，新的治疗手段成为癌症治疗方向的研究热门[1]。近年来，中科院刘新垣院士提出的肿瘤的靶向基因-病毒治疗策略(cancer targeting gene-viro-therapy)已经成为一个研究热点[2]。该课题组利用基因工程技术，对5型腺病毒进行改造，得到的病毒称作ZD55[3-4]。本课题所使用的病毒由Zhang等提供，其将ZD55 的E1A区启动子改造为肝癌特异性启动子甲胎蛋白启动子AFP，并由其启动插在E1B处外源基因Apoptin的表达，成为产物AD·AFP·E1A·E1B(△55)·Apoptin，改造后的病毒简称为AD55-Apoptin。体内实验及体外实验结果均表明，携带抑癌基因的重组腺病毒AD55-Apoptin具有更高的抗肿瘤效应和更低的毒副作用。

Apoptin 是一种可以特异性诱导肿瘤细胞凋亡而对正常细胞不产生影响的蛋白[5]，其通过在细胞中定位不同来诱导细胞凋亡。……