刘　端，吴　俊，吴祥甫

(1.浙江理工大学生命科学学院，杭州310018；2．德赛诊断系统(上海)有限公司，上海201318)



人C-反应蛋白(CRP)基因的克隆及表达研究

刘端1，吴俊2，吴祥甫1

(1.浙江理工大学生命科学学院，杭州310018；2．德赛诊断系统(上海)有限公司，上海201318)

人C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)参与人体炎症反应，是临床诊断中的重要检测指标。利用家蚕杆状病毒表达系统构建重组人CRP病毒vBmHis-CRP，接种家蚕五龄幼虫表达重组人CRP蛋白。利用自制抗CRP血清Western Blot检测重组蛋白得到目的条带，纯化后BCA法测定蛋白含量为30 μg/mL，质谱检测进一步确定该蛋白为目的蛋白。这为家蚕生物反应器规模化制备重组人CRP蛋白打下了基础，为解决临床CRP相关炎症反应快速诊断试剂盒中标准抗原的来源问题提供了依据。

C-反应蛋白(CRP)；杆状病毒；家蚕；Western Blot

0　引　言

1930年，Frances 及Tillet经过研究发现了C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)，他们从感染肺炎双球菌的严重肺炎病人血清中鉴定出了一种能与肺炎双球菌细胞壁的C多糖结合形成沉淀的物质，将这种物质称为C-反应蛋白[1]。后来，人们发现这个反应不只发生在由肺炎双球菌引发的肺炎中，在多种急性感染中都有发生，这是人体对炎症的早期反应，所以此蛋白又叫“急性时相蛋白”[2]。人C-反应蛋白由人的肝细胞合成，是五聚体蛋白 ，由5个完全相同的非共价亚基构成，总分子量接近118 kD。健康人体内水平通常小于10 mg/L，然而，在疾病状态，这一水平在开始的6～8 h快速增加，大约48 h可以达到峰值，接近350～400 mg / L[3]。

与许多急性时相蛋白一样，CRP在血清中通常是痕量级别，但在很多感染和炎症条件下浓度急剧增长[4-5]。……