人乳牙牙髓干细胞全蛋白质非胶分级分离电泳分析
2016-09-14王劲松赵君朋
胡 家, 李 蕾, 王劲松, 赵君朋*
(1首都医科大学医学实验与测试中心,北京 100069; 2首都医科大学基础医学院; *通讯作者,E-mail: jp75@mail.ccmu.edu.cn)
人乳牙牙髓干细胞全蛋白质非胶分级分离电泳分析
胡家1, 李蕾1, 王劲松2, 赵君朋1*
(1首都医科大学医学实验与测试中心,北京100069;2首都医科大学基础医学院;*通讯作者,E-mail: jp75@mail.ccmu.edu.cn)
目的对人乳牙牙髓干细胞全蛋白质进行非胶分级分离电泳,并用液质联用质谱分析所得蛋白质组分。方法对人乳牙牙髓干细胞进行裂解,将所得的细胞全蛋白质均分到12孔样品槽里进行非胶分级分离电泳,液相回收电泳后的12个组分,对各组分进行SDS-PAGE分离,并对各组分进行溶液酶切后再进行液质联用质谱分析。结果SDS-PAGE图谱显示人乳牙牙髓干细胞全蛋白质经非胶分级分离电泳分成了12个不同的蛋白质组分,液质联用对各组分进行分析均成功鉴定到一定数目蛋白质。结论非胶分级分离电泳能将复杂蛋白质样品进行预分离,液相回收分离后样品便于进行液质联用分析。
非胶分级分离电泳;细胞全蛋白质;液质联用质谱;蛋白质组
蛋白质是生命活动的执行者,因此研究蛋白质组才能真正认清各种生理现象的分子机制。质谱技术是蛋白质组学的常用方法之一,通过质谱鉴定能认识某一蛋白质组的各个蛋白质组成。在进行质谱分析之前一般会对样品进行适当分离,如十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、双向电泳、液相分离、离子交换等,每种方法均有自身的优势及缺点,样品分离的质量直接关系质谱检测结果。……
