陶鹏辉

(河南省信阳市中心医院检验科　464000)



血清抗CCP抗体和抗AKA抗体联合检测对类风湿关节炎的诊断价值

陶鹏辉

(河南省信阳市中心医院检验科464000)

目的探讨抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)、抗角蛋白抗体(抗AKA抗体)检测对类风湿关节炎(RA)诊断的敏感度和特异性，以及二者联合检测在RA诊断中的应用价值。方法分别采用化学发光微粒子免疫检测法、间接免疫荧光法检测抗CCP抗体、抗AKA抗体，共检测80例RA患者，40例其他自身免疫性疾病患者和30例健康体检者。结果RA组抗CCP抗体和抗AKA抗体的阳性率明显高于非RA组和对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。单独检测抗CCP抗体的灵敏度为73.8%高于抗AKA抗体(41.3%),特异性为86.2%低于抗AKA抗体(95.7%),二者联合检测时敏感度和特异性均有所增高。结论抗CCP抗体对RA患者有很高的敏感度和特异性,并且与抗AKA抗体联合检测对于RA的临床诊断和预后判断具有很高的临床应用价值。

类风湿关节炎；抗环瓜氨酸肽抗体；抗角蛋白抗体；间接免疫荧光法

类风湿关节炎(RA)是一种自身免疫性疾病，我国患病率为0.41%[1]。其特征是以手和足小关节为主的多关节、对称性、侵袭性关节炎症，患者最终出现不可逆的骨关节破坏而导致关节畸变和丧失劳动力[2]。本病多为一种反复发作性疾病，致残率较高，预后不良，目前还没有很好的根治方法。目前国内对于RA的血清学诊断指标仅限于类风湿因子(RF)的检测，RF的敏感度虽然相对较高，但其特异性较低，对于RA早期诊断效果不够理想。近年文献报道一组以瓜氨酸化的聚丝蛋白或前聚丝蛋白衍生物为底物的抗体对RA诊断有较高特异性，抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)、抗角蛋白抗体(抗AKA抗体)在诊断RA中具有关键作用。本研究通过回顾性分析抗CCP抗体及抗AKA抗体在RA诊断中的敏感度和特异性，并进一步分析比较，以探讨两者在RA诊断中的临床应用价值。

1　资料与方法

1.1一般资料选取本院2014年1～12月风湿免疫科门诊及住院RA患者80例，符合2010年美国风湿病协会(ACR)和欧洲抗风湿病联盟(EULAR)重新修订的RA诊断标准。非RA组：其他自身免疫病组为同期风湿免疫科门诊及住院患者40例，包括系统性红斑狼疮、混合性结缔组织病等患者，均符合国内或国际相应的诊断标准。健康对照组：同期在本院体检中心健康体检者30例。

1.2方法采集所有受试者晨起空腹静脉血3 mL,以4 000 r/min离心5 min后分离血清，4 h内需要完成检测；抗CCP抗体检测采用罗氏公司Cobas e 601免疫化学发光仪及配套试剂。抗CCP抗体临界值为17 U/mL。抗AKA抗体检测采用间接免疫荧光法，试剂由德国EUROIMMUN 医学试验诊断有限公司提供。血清做1∶10稀释，抗AKA抗体与大鼠食管冰冻切片反应，形成围绕角质层细胞的线状、板层状的典型荧光，荧光模式与阳性对照所显示的一致即判为阳性。

1.3统计学处理数据经过SPSS17.0统计软件处理，计数数据以率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2　结　　果

2.1各指标检测的阳性率比较见表1。

表1　　各指标检测的阳性率比较[n(%)]

注：与其他两组比较，*P<0.05。

2.2各指标单项检测与联合检诊断价值比较见表2。

表2　　各指标单项检测与联合检诊断价值比较(%)

3　讨　　论

RA是一种病因尚未阐明的由自身免疫系统功能障碍引起免疫系统攻击关节的长期慢性炎症，女性好发，发病率为男性的2～3倍，可发生于任何年龄阶段，高发年龄层为40～60岁。主要临床表现为受累关节肿胀、疼痛、功能下降、病变持续反复发作的过程。RA疾病表现在关节部位，问题出在免疫系统，致病根源是在免疫系统的T淋巴细胞，表现主要为Th1/Th2的失衡，导致免疫功能的紊乱，进而产生慢性无菌性滑膜炎症，随着无菌性炎症刺激骨质和增生增厚则会出现关节受累，以致累及到心脏、呼吸系统、神经系统以及肾脏，甚至致残致死。RA是一种以慢性进行性关节病变为主的全身性免疫性疾病，也是“不死的癌症”风湿病中最常见的一种类型，症状主要为关节疼痛、肿胀、活动困难及发僵，长期不愈的晚期症状则为关节畸形和强直，或导致终身残疾。一旦出现早期症状，应尽早接受专业化治疗，并定期做相关检测，以便及时确诊和了解病情进展，调整用药，延缓病情进展，改善关节功能，提高患者的生存质量。大多数RA的病情可得到很好的控制，甚至完全缓解。研究发现，根据RA发病早期的临床特点可大致判断其预后，某些临床及实验室指标对病情估计及指导用药很有意义。

在2000年，Schellekens 等[3]将1条由19个氨基酸残基组成的瓜氨酸肽链中的2个丝氨酸替换为半胱氨酸，形成与β-转角具有相似结构的二硫健，合成环瓜氨酸肽(CCP)，并建立以人工合成CCP为抗原的检测方法。抗CCP抗体不仅是RA早期诊断项目，而且是鉴别侵蚀性或者非侵蚀性RA的灵敏指标，抗CCP抗体阳性患者一般出现或容易演变成较阴性者更严重的关节骨质损坏。抗CCP抗体与RA的骨侵蚀、关节功能障碍密切相关[4]。还有临床研究显示，抗CCP抗体可以作为评价疾病活动度及预示骨质侵蚀的指标[5-6]。本研究表明抗CCP抗体在RA组的阳性率明显高于非RA组和对照组，在RA诊断中敏感性为73.8%,而特异性为86.2%,在非RA组的阳性检出率只有5%，健康者中没有查出,说明抗CCP抗体是诊断RA特异性较高的血清学指标。2010年美国风湿病协会(ACR)和欧洲抗风湿病联盟(EULAR)重新修订了诊断标准中，把抗CCP抗体纳入RA血清学诊断标准[7]。抗CCP抗体的临床意义不仅是早期RA的预测指标，其出现往往早于RA典型临床症状,也是RA的临床监测指标，用于判断RA的活动情况，更是RA的预后指标，抗CCP抗体阳性的患者其影像学破坏的程度较抗体阴性者严重。

1979年Young等发现RA患者血清中有一种能与鼠食管角质层反应的抗体，并对RA具有特异性，命名为AKA。1989年Vincent等提出应把AKA更名为抗角质层抗体(抗AKA抗体)更为恰切。由于AKA在疾病临床症状出现之前就可以在血清中被检测到，提示了AKA在RA进程中扮演者重要的角色[8]。因此,该抗体的检测可对RF阴性的RA患者提供检查指标。抗AKA抗体与RA病情严重性和活动性有关,在RA早期甚至临床症状出来前即可检出,所以，抗AKA抗体检测对RA早期诊断和预后判断很有意义。本试验发现抗AKA抗体虽然敏感度不高(41.3%)，但具有较高的特异度(95.7%)，抗AKA抗体是RA较理想的临床实验项目。由于RA的发病机制至今不明，临床诊断方法采用多项指标联合测定。本研究发现抗CCP抗体与抗AKA抗体联合测定，不仅提高了敏感度，特异度也提高到100%，能避免单项检测的局限性，减少漏诊，可当做RA确诊的重要依据，特别适用于RF阴性或症状不明显的RA。在检测中，发现对于疑似早期RA患者进行抗CCP抗体与抗AKA抗体联合检测，对RA的早期诊断、病情监测、疗效观察和预后判断等均有十分重要的临床意义。

[1]富炳罡．抗CCP抗体和RF联合检测对类风湿关节炎诊断的价值[J]．中国实验诊断学，2010，14(6)：910-911．

[2] Scott DL，Huizinga TW．Rheumatoid arthritis[J]．Lancet，2010，376(9)：1094-1108．

[3]Schellekens GA，Visser H，De Jong BA,et al.The diagnostic properties of rheumatoid arthritis antibodies recognizing a cyclic citrullinated peptide[J].Arthritis Rheum，2000，28(1)：155-163．

[4]谢其冰，尹耕．三种自身抗体在类风湿关节炎诊断及关节侵蚀预测中的价值[J]．四川大学学报(医学版)，2009，40(3)：508-512．

[5]牛红青，李小峰，张莉芸，等．抗环瓜氨酸抗体与类风湿关节炎疾病活动及骨侵蚀关系的研究[J]．中华风湿病学杂志，2008，12(9)：603-604．

[6] 邹旭美，陆焱，胡志刚．抗-CCP诊断类风湿关节炎的临床应用分析[J]．国际检验医学杂志，2011，32(1)：120-121．

[7]颜海希,蔡林灵,金高兵,等.抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体检测对类风湿性关节炎诊断的Meta分析[J].中华检验医学杂志,2014,37(8):603-607.

[8]Berthelot JM，Maugam Y，Castagne A，et al．Antiperinuclear factors are present in polyarthritis before ACR criteria for rheumatoid arthritis are fulfilled[J].Ann Rheum Dis，1997，56(1)：123-125．

Clinical application value of combination detection of serum anti-CCP antibody and anti-AKA antibody for rheumatoid arthritis

TAOPenghui

(DepartmentofClinicalLaboratory,XinyangMunicipalCentralHospital,Xinyang,Henan464000,China)

ObjectiveTo explore the sensitivity and specificity of anti-cyclic citrullinated peptide antibody (anti-CCP antibody) and anti-keratin antibody (anti-AKA antibody) detection for diagnosing rheumatoid arthritis (RA) and the application value of their combination detection in the diagnosis and treatment of RA.MethodsThe chemiluminescent microparticle immunoassay and indirect immunofluorescence analysis were adopted to detect anti-CCP antibody and anti-AKA antibody in 80 cases of RA,40 cases of other auto-immune diseases(AID) and 30 people undergoing the physical examination.ResultsThe positive rates of anti-CCP antibody and anti-AKA antibody in the RA group were significantly higher than those in the non-RA group and control group,the differences were statistically significant (P<0.05).The sensitivity of single anti-CCP antibody detection in the RA group was 73.8%,which was higher than 41.3% of anti-AKA antibody,while the specificity of single anti-CCP antibody detection was 86.2%,which was lower than 95.7% of anti-AKA antibody detection.In their combined detection,the sensitivity and specificity were increased.ConclusionThe anti-CCP antibody detection has higher sensitivity and specificity for diagnosing RA.Its combined detection with anti-AKA antibody can avoid the missed diagnosis of atypical clinical early stage RA,which has a higher clinical value in the diagnosis and prognosis of RA.

rheumatoid arthritis;anti-cyclic citrullinated peptide antibody;anti-keratin antibody;indirect immunofluorescence

陶鹏辉，男，副主任技师，主要从事临床免疫、生化与微生物学检验与研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.16.031

A

1673-4130(2016)16-2285-02

2015-12-10)