王焕，张慧，崔凯，冯衍生

(1新乡市中心医院，河南新乡453000；2新乡医学院)



慢性肾脏病患者肾组织中Klotho基因启动子羟甲基化水平观察

王焕1，张慧2，崔凯1，冯衍生2

(1新乡市中心医院，河南新乡453000；2新乡医学院)

目的观察慢性肾脏病(CKD)患者Klotho基因启动子羟甲基化水平变化，并探讨其与CKD临床病理参数的关系。方法1～3期CKD患者58例，肾脏穿刺取肾脏组织(CKD组)；肾结核患者31例，取手术切除的正常肾脏组织(对照组)。将各组抽提的全基因组DNA分为两份，一份以15 mmol/L高钌酸钾、0.05 mol/L氢氧化钠氧化后，进行亚硫酸盐转化；另一份直接进行亚硫酸盐转化。用特异引物进行PCR扩增，焦磷酸测序，检测羟甲基化并计算其在甲基化中所占比例。分析Klotho基因启动子羟甲基化水平与CKD临床病理参数的关系。结果对照组肾脏组织Klotho基因启动子羟甲基化修饰；CKD组肾脏组织Klotho基因启动子甲基化水平高于对照组，羟甲基化水平低于对照组(P均<0.05)。CKD患者Klotho基因启动子羟甲基化水平与eGFR呈正相关关系，与肾小管间质纤维化面积及肌酐水平呈负相关。结论CKD患者肾脏组织中Klotho基因启动子羟甲基化水平降低，并与CKD临床病理参数有关。Klotho基因启动子羟甲基化水平下降可能参与了CKD的发生发展。

慢性肾脏病；Klotho基因；基因启动子；羟甲基化

慢性肾脏病(CKD)是指一类在各种致病因子影响下，以肾脏慢性纤维化为病理特征的临床疾病的总称，发病率较高[1]。由于CKD缺乏有效治疗手段，最终导致肾功能逐渐恶化，进展为终末期肾病需行肾脏替代治疗，严重影响患者生活质量。研究[2～5]表明，肾脏功能发生异常多伴随Klotho表达下降。Klotho基因启动子甲基化被证明与CKD有关。但对于Klotho基因启动子甲基化水平是如何发生动态变化、其CpG岛甲基化是否还存在其他种类修饰目前尚不清楚。近年研究较多的羟甲基化是一种以5甲基胞嘧啶(5mC)为基础发生的氧化去甲基化修饰，被认为是潜在的基因转录重新激活标志。……