左鹏举,王春秀,高春生

(河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002)



黄河鲤金属硫蛋白基因的克隆及表达分析

左鹏举,王春秀,高春生*

(河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002)

采用RT-PCR方法克隆获得黄河鲤(Cyprinus carpio)金属硫蛋白基因的编码区(CDS)序列,该序列长183bp,编码60个氨基酸,不含芳香族氨基酸,其中20个半胱氨酸(Cys)集中分布在肽链的N端和C端,具有MT典型的Cys-X(1～3个)-Cys结构,预测分子量为6013D,理论等电点为8.38。经多序列比对，黄河鲤与高身鲫(Carassius cuvieri)的同源性最高，达94%。采用RT-qPCR进行黄河鲤MT的组织表达分析,结果表明:黄河鲤MT基因的表达存在组织性差异,其相对表达量表现为肝脏>肾脏>腮>脑>肌肉。

金属硫蛋白基因;黄河鲤;实时荧光定量;表达分析

金属硫蛋白(MetaIIothionein,MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸,能被金属离子、氧化损伤以及免疫刺激等多种因素诱导产生的分泌型蛋白[1]。MT在生物进化上较为保守[2],目前已知的分离出来的MT的分子大小和形状基本一致。MT广泛存在于动物体内,具有很强的金属结合能力和氧化还原能力,除维持金属动态平衡和重金属解毒外,还可参与清除自由基、拮抗电离辐射和抗应激等[3]。

黄河鲤(Cyprinus carpio)属鲤形目、鲤科,是我国北方重要的经济鱼类,其分布广泛、生命力强,对水环境变化反应灵敏[4]。我们以黄河鲤为研究对象,克隆了它的MT编码区序列,并监测了其MT基因的组织表达差异,以期明确其MT基因的功能及表达，为将MT作为黄河鲤养殖水环境污染监测的生物标志的研究提供理论基础[5]。