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一种提取血小板蛋白的新方法

2016-09-06钱春美李永新杨兴才张晓峰

实验技术与管理 2016年3期
关键词:实验方法研究

李 宁, 管 宇, 钱春美, 李永新, 杨兴才, 张晓峰

(上海中医药大学 附属上海市中医医院, 上海 200071)



一种提取血小板蛋白的新方法

李宁, 管宇, 钱春美, 李永新, 杨兴才, 张晓峰

(上海中医药大学 附属上海市中医医院, 上海200071)

目的:探讨高质量提取血小板蛋白的方法。方法:比较传统与改进后的提取血小板蛋白量,并进行蛋白定量和免疫蛋白印迹实验。结果:改进后的方法提取蛋白量平均为1.86 g/L,传统方法为1.21 g/L。免疫蛋白印迹实验表明,改进后的方法提取蛋白量高于传统方法,并且APP检测的结果好于传统方法。结论:通过实验可以得出改进后的提取蛋白方法,更有利于进行后续Alzheimer病的机理研究。

蛋白提取; 血小板; β-淀粉样前体蛋白

在细胞中,蛋白行使着重要的功能,参与细胞所有的功能性过程[1]。近年来,随着对Alzheimer病(AD)的研究,作为衡量其诊断效果的指标之一的血小板β-淀粉样前体蛋白(APP)成为研究热点[2]。血小板表达3种APP异构体:APP695、APP751、APP770。AD患者血小板APP异构体比率(APP130/APP106)异常可作为辅助诊断AD的重要生物指标[3]。从血小板中提取总蛋白检测APP就成为一个关键实验技术。本研究主要从基础研究出发,探讨一种新型的提取血小板总蛋白的方法,从而简化其流程。这种新的提取蛋白的方法对进一步研究APP异构率有着重要的作用。

1 材料与方法

1.1主要试剂

BCA蛋白定量试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司;RIPA蛋白提取试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司;磷酸盐缓冲液(PBS)购自南京凯基生物……

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