余化龙，何宁，刘志刚，熊敏

(湖北医药学院附属东风医院,湖北十堰442008)



骨髓间充质干细胞联合EPO对急性脊髓损伤大鼠神经运动功能的影响及机制探讨

余化龙，何宁，刘志刚，熊敏

(湖北医药学院附属东风医院,湖北十堰442008)

目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合促红细胞生成素(EPO)治疗急性脊髓损伤的效果，并探讨其作用机制。方法采用脑红蛋白(Ngb)基因重组绿色荧光蛋白-腺病毒载体转染BMSCs，构建Ngb基因修饰的BMSCs。取成年雄性SD大鼠80只制作脊髓损伤模型，分为联合组、EPO组、BMSCs组、对照组各20只，联合组于造模前1 d予5 000 U/kg EPO腹腔注射，造模后于受损脊髓中点及受损中点上下5 mm注入Ngb基因转染的BMSCs各5 μL；EPO组于造模前1 d腹腔注射5 000 U/kg EPO，造模后于脊髓中注入等量不含细胞的培养基；BMSCs组于造模前1 d腹腔注射等量生理盐水，造模后脊髓注入等量Ngb基因转染BMSCs；对照组仅在脊髓损伤前1 d经腹腔注射等量生理盐水，造模后在受损脊髓中注射等量不含细胞培养基。分别于干预1、3、7、14、21 d，采用BBB评分法评价各组神经运动功能，采用BCA蛋白定量试剂盒检测脊髓Ngb 蛋白表达。结果干预1、3、7、14、21 d联合组BBB评分均高于EPO组、BMSCs组、对照组，P均<0.05；干预1、3、7、14、21 d联合组Ngb相对表达量均高于EPO组、BMSCs组、对照组，P均<0.05；干预3、7、14、21 d BMSCs组Ngb相对表达量均高于EPO组、BMSCs组、对照组，P均<0.05；干预3、7、14、21 d EPO组Ngb相对表达量均高于对照组，P均<0.05。结论 Ngb基因修饰的BMSCs联合EPO可明显提高急性脊髓损伤大鼠的神经运动功能，可能与促进Ngb表达有关。

骨髓基质干细胞；促红细胞生成素；脊髓损伤；脑红蛋白

脊髓损伤是临床常见的神经损伤，致残率和致死率均较高[1, 2]。其预后较差，多数患者的运动、感觉恢复情况均不理想。因此，寻求一种较好的恢复脊髓功能的治疗手段是目前的研究热点。近年来，细胞移植以及基因治疗为脊髓损伤的治疗提供了新思路[3]。骨髓间充质干细胞(BMSCs)是具有多向分化潜能的干细胞，可分泌促进神经生长的因子，促进脊髓损伤的修复[4]。……