梁新军，魏少忠

(湖北省肿瘤医院，武汉430079)



Shh信号通路阻断对人结肠癌细胞HT-29增殖、侵袭的影响及机制探讨

梁新军，魏少忠

(湖北省肿瘤医院，武汉430079)

目的观察阻断Sonic Hedgehog(Shh)信号通路对人结肠癌细胞HT-29增殖和侵袭的影响，并探讨其机制。方法取对数生长期HT-29细胞分为A、B、C、D组，分别置于含0、5、10、20 μmol/L Shh信号通路特异性抑制剂Cyclopamine的培养基中培养。采用MTT法检测各组干预24、48、72 h时细胞增殖抑制率，采用Transwell法检测各组干预48 h时体外侵袭能力，采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞Shh、下游转录因子GLI1 mRNA。结果干预24、48、72 h时各组细胞增殖抑制率为B组B组>C组>D组，P均<0.05。结论阻断Shh信号通路可抑制HT-29细胞增殖、降低体外侵袭能力，可能与其降低Shh、GLI1表达有关。

结肠癌；Shh信号通路；下游转录因子；细胞增殖；细胞侵袭

结肠癌是临床常见的恶性肿瘤之一，发病率已跃居全球恶性肿瘤的第3位，其发病机制目前尚不明确[1]。基因突变和表观遗传学改变等参与了结肠癌的发生、发展过程[2]。Sonic Hedgehog(Shh)信号通路是调控胚胎发育及细胞分化的重要通路，GLI1是其下游转录因子。研究发现，Shh信号通路在肺癌、乳腺癌、胃癌、结肠癌等多种恶性肿瘤中呈激活状态，且与肿瘤的恶性程度和患者预后密切相关[3～5]。目前Shh信号通路在结肠癌中的具体作用机制的研究报道较少。2015年1～12月，我们观察了阻断Shh信号通路对人结肠癌细胞HT-29增殖和侵袭的影响，并探讨其在结肠癌发生、发展中的意义。现报告如下。

1　材料与方法

1.1材料HT-29购自美国ATCC公司，置于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中，于37 ℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱内培养。胎牛血清、RPMI 1640培养基及TRIzol为美国Gibco公司产品；胰酶、DMSO、MTT、Shh信号通路特异性抑制剂Cyclopamine等购自Sigma公司；SY……