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金黄色葡萄球菌DPO-PCR快速检测方法的建立与应用

2016-09-03李丹丹徐义刚邱索平高会江高慎阳

食品与生物技术学报 2016年4期
关键词:检测方法设计

李丹丹, 徐义刚,邱索平, 王 昱,高会江, 高慎阳

(1.海南出入境检验检疫局 检验检疫技术中心,海南 海口 570311;2.东北农业大学 动物医学学院,黑龙江 哈尔滨150030;3.从化出入境检验检疫局,广东 从化510900;4.重庆出入境检验检疫局 检验检疫技术中心,重庆404100;5.中国农业科学院 北京畜牧兽医研究所,北京 100193;6.辽宁医学院 畜牧兽医学院,辽宁 锦州121001)

金黄色葡萄球菌DPO-PCR快速检测方法的建立与应用

李丹丹1, 徐义刚*2,邱索平3, 王 昱4,高会江5, 高慎阳6

(1.海南出入境检验检疫局 检验检疫技术中心,海南 海口 570311;2.东北农业大学 动物医学学院,黑龙江 哈尔滨150030;3.从化出入境检验检疫局,广东 从化510900;4.重庆出入境检验检疫局 检验检疫技术中心,重庆404100;5.中国农业科学院 北京畜牧兽医研究所,北京 100193;6.辽宁医学院 畜牧兽医学院,辽宁 锦州121001)

为建立检测金黄色葡萄球菌(SA)的PCR方法,以SA Sa442基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸引物(DPO),建立了SA的DPO-PCR快速检测方法。结果显示,在45~65℃退火温度范围内均能高效地扩增出目的基因,表明DPO引物对退火温度不敏感,该方法的灵敏度为2.27×102cfu/mL,同时DPO引物特异性强,与其他菌株无非特异性扩增反应。利用该方法和行标法分别对采集的175份样品进行检测,均共计检出13份SA阳性样品,两者符合率为100%。作者建立的DPO-PCR方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性,为快速准确检测SA提供新的检测手段。

金黄色葡萄球菌;Sa442基因;DPO-PCR

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)是一种重要的人畜共患病致病菌,具有重要的公共卫生意义。在食品微生物检验工作中,金黄色葡萄球菌是进出口动物性食品必检的食源性致病菌。……

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