马奎影，万　全，王伊林，陶谢鑫，黄　侠，柴　花，赵　明

(内蒙古民族大学附属医院，通辽 028000)



黄芪注射液对网腔钙结合蛋白基因沉默阿霉素损伤心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78，GRP94 mRNA的作用*

马奎影，万全，王伊林，陶谢鑫，黄侠，柴花，赵明△

(内蒙古民族大学附属医院，通辽 028000)

目的：研究黄芪注射液对网腔钙结合蛋白(calumenin)基因沉默阿霉素损伤心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78，GRP94 mRNA的作用。方法：实验将体外培养的1～3 d乳鼠心肌细胞分为5组：对照组、模型组(正常细胞+3 mg/L阿霉素)、calumenin基因沉默模型组(慢病毒感染细胞+3 mg/L阿霉素)、黄芪组1(正常细胞+3 mg/L阿霉素+200 g/L黄芪)、黄芪组2(慢病毒感染细胞+3 mg/L阿霉素+200 g/L黄芪)。构建慢病毒-calumenin质粒，转染乳鼠培养心肌细胞,采用实时荧光定量分析(real-time PCR)检测各组心肌细胞calumenin及内质网应激伴侣蛋白GRP78、GRP94 mRNA表达。结果：①与对照组比较，模型组心肌细胞calumenin mRNA表达减少(P<0.05)，而calumenin基因沉默模型组及黄芪组2心肌细胞calumenin mRNA表达明显减少(P<0.01)；与模型组比较，黄芪组1心肌细胞calumenin mRNA表达增加(P<0.05)；与calumenin基因沉默模型组比较，黄芪组2心肌细胞calumenin mRNA表达明显增加(P<0.01)。②与对照组相比较，模型组及calumenin基因沉默模型组心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78、GRP94 mRNA表达明显增多(P<0.01)；与模型组比较，黄芪组1心肌细胞GRP78、GRP94 mRNA表达明显减少(P<0.01)；与calumenin基因沉默模型组比较，黄芪组2心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78、GRP94 mRNA表达明显减少(P<0.01)。结论：①阿霉素损伤可引起心肌细胞calumenin表达减少。②Calumenin可缓解阿霉素损伤所诱导心肌细胞内质网应激。黄芪注射液可抑制阿霉素损伤所诱导心肌细胞内质网应激，这种作用可能系通过calumenin介导实现的。

阿霉素；黄芪；网腔钙结合蛋白；内质网应激;心肌细胞;乳鼠

阿霉素属蒽环类抗癌药物，具有抗瘤谱广、抗瘤活性强的特点，临床上广泛应用于多种恶性肿瘤治疗。但因对心肌的毒性作用，限制了其在抗肿瘤中的临床应用。随其剂量的增加而导致不可逆的心肌损伤，最终可发生扩张性心肌病及充血性心力衰竭[1]。关于阿霉素心肌损伤的发病机制目前尚不清楚，主要有以下观点：(1)自由基损伤；(2)线粒体损伤；(3)钙超载；(4)细胞凋亡[2]。凋亡的产生机制复杂,近年发现内质网应激反应介导的细胞凋亡是一条新的细胞凋亡信号转导通路[3]。网腔钙结合蛋白……