宋天宇，赵鹏，余涛,2，蒋辉,2（、防化研究院；2、国民核生化灾害防护国家重点实验室，北京 02205）

枯草芽胞杆菌芽胞表面展示系统的构建

宋天宇1，赵鹏，余涛1,2，蒋辉1,2
（1、防化研究院；2、国民核生化灾害防护国家重点实验室，北京 102205）

摘要：枯草芽胞杆菌芽胞展示系统具有稳定性高、安全性好、易收集纯化等特点，已广泛应用于疫苗和药物的制备、酶类及其他功能蛋白的生产等领域，同时其在生化战剂的检测、洗消、生物修复等方面也具有重要的应用价值。本实验以绿色荧光蛋白为模型蛋白，以CotG和CotZ为锚定蛋白，构建枯草芽胞杆菌芽胞表面展示系统，并成功将绿色荧光蛋白展示在枯草芽胞杆菌的芽胞表面，为今后获得可在复杂条件下发挥生物活性、贮存稳定性高、生产成本低的功能芽胞提供技术基础。

关键词：枯草芽胞杆菌；芽胞；表面展示；绿色荧光蛋白

1　前言

枯草芽胞杆菌芽胞表面展示技术是通过基因重组将外源蛋白与芽胞的锚定蛋白基因进行基因融合，在芽胞形成过程中衣壳蛋白携带融合表达的外源蛋白组装在芽胞表面，使其发挥特定的生物活性。枯草芽胞杆菌由于安全性好、遗传操作体系完善的特点被广泛应用于食品、医药等行业，而枯草芽胞杆菌芽胞优良的抗逆性使其成为一种理想的表面展示载体，保证了外源蛋白在复杂环境下的保存、运输和生物活性［1， 2］。

枯草芽胞杆菌芽胞含有70多种衣壳蛋白，其中以CotG作为锚定蛋白已成功展示了β-半乳糖苷酶、植酸酶、N-乙基神经氨酸醛缩酶、α淀粉酶等多种酶类［3，5］，在酶制剂生产方面已显示出良好的应用前景，对生化战剂的检测、洗消、生物修复等领域的研究和应用具有重要意义。……