鄯科明，滕中秋



膜电喷雾质谱法快速检测细菌氨基糖苷耐药性

鄯科明1，滕中秋2,3,4

目的针对细菌耐药性的产生和传播已成为全球重要公共卫生问题的现状，拟建立细菌氨基糖苷耐药性的快速检测方法。方法基于膜电喷雾质谱法，以ArmA蛋白的特异性肽段TYDVVFLLK (TK-9)特征性母子离子对为检测目标，建立了细菌氨基糖苷耐药性的快速检测方法。结果采用合成的标准肽段用于建立和验证定性定量检测方法学。由于膜电喷雾离子化技术可大幅度提高质谱检测灵敏度，使得检测流程仅需进行2 h增菌，与微波酶解法配合运用可最大程度缩短样本前处理流程。结论经验证该方法可成功检测模拟真实环境样本中细菌氨基糖苷耐药性，具有极高的检测灵敏度和准确度。在今后的研究中有望将该方法用于对环境样本中其它细菌耐药蛋白的快速检测。

膜电喷雾离子化；快速检测；细菌耐药；ArmA

Rapid detection of bacterial aminoglycoside resistance using membrane electrospray ionization mass spectrometry

Supported by the Natural Science Foundation of China (No.81471919) and the Research Foundation of China CDC (No.2014A101).

细菌耐药性的产生和传播已成为全球重要的公共卫生问题[1]。细菌依靠可移动元件如插入序列、质粒和“耐药基因组岛”等可快速获得抗生素耐药性[2]。目前，虽有超过15种针对细菌不同生理或代谢功能而设计的抗生素得到广泛应用，但是在细菌的各种耐药机制面前他们无一幸免[3]。面对每种抗生素，细菌都随之进化出了应对策略，而其中的耐药机制则与一系列的耐药基因有关。例如细菌获得qnrA/B/S基因则对氟喹诺酮类抗生素产生耐药性[3-4]，获得blaCTX-M和blaNDM-1基因则对β-内酰胺类和碳青霉烯类抗生素产生耐药性[5-7]，具有mcr-1则耐多黏菌素抗生素[8]，具有armA则耐氨基糖苷类抗生素等等[9-10]。……