段　练　熊兴江　李　军

(中国中医科学院广安门医院心内科,北京,100053)



稳心汤的急性毒理实验研究

段练熊兴江李军

(中国中医科学院广安门医院心内科,北京,100053)

目的:稳心汤是治疗冠心病介入术后不稳定性心绞痛的有效方剂。本研究旨在观察稳心汤的急性毒性,以评估其安全性。方法:以稳心汤的最大给药浓度(5.2 g/mL)及最大给药体积(0.7 L/20 g·次)予小鼠灌胃,分别于24 h内分3次灌胃,连续观察2周。详细记录实验小鼠的外观、行为、一般状态、呼吸、中毒反应及死亡状况;每天记录存活实验小鼠的体重及饲料量。实验结束后抽血检测肝肾功能。结果：实验小鼠灌胃稳心汤3次/d,最大给药量为425 g/kg,未发现显著的急性毒性反应,肝肾功能检测亦未有异常异常。结论：稳心汤具有较好的安全性。

稳心汤;急性毒性;小鼠

冠心病是心血管临床的常见病、多发病,是致残和死亡的重要原因之一,已成为全球重大公共卫生问题。近30年来，随着影像学及导管技术的不断发展，冠状动脉介入治疗已经成为新的治疗手段,并被广泛应用于冠心病的临床治疗,能够较好地改善冠心病患者的不适主诉及远期预后。然而,介入术后的心绞痛复发、支架内再狭窄、血栓形成等并发症日益受到医学界关注[1-2]。中医学在冠心病介入术后并发症的防治上具有一定的优势,大量的研究证实中医药能够改善不稳定性心绞痛患者介入术后的生活质量及中医学证候规律,促进患者康复[3-6]。基于课题组10余年的理论与临床研究,发现胸阳不振、心脉瘀阻是冠心病不稳定性心绞痛介入术后的基本病机[7]。其中,阳虚、血瘀在冠心病不稳定性心绞痛疾病中贯穿始终,而扶阳活血则为其主要治则治法[8-11]。在临床治疗中,基于“扶阳活血”治则治法而成的“稳心汤”是课题组治疗介入术后并发症的基本方剂,研究发现本方不仅能有效改善心绞痛症状,改善缺血心电图,更能显著调节血液流变学、血脂等[12-14]。本研究旨在观察稳心汤的急性毒性,以评估其安全性。

1　资料与方法

1.1实验用药稳心汤由广安门医院煎药室提供。稳心汤组成：党参15 g、肉桂3 g、细辛3 g、瓜蒌12 g、赤芍12 g、川芎10 g、莪术9 g、姜黄9 g、大黄8 g(后下)、全蝎9 g、麦冬12 g、山楂15 g、炙甘草6 g。在急性毒性实验研究中,用0.5%羧甲基纤维素钠水溶液将受试药配成最大给药浓度(5.2 g/mL)。

1.2实验动物选取SPF级昆明小鼠(KM小鼠)40只,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,体重19.0～21.0 g,按体重随机分为2组,即治疗组与对照组各20只(雌雄各半)。动物雌雄分笼饲养于中国中医科学院广安门医院实验动物中心。实验动物中心观察室的室温保持20～25 ℃,相对湿度保持38%～41%,环境清洁。

1.3试剂试剂盒丙氨酸氨基转移酶(ALT)：批号：8799；江莱生物；天门冬氨酸氨基转移酶(AST)：批号：9573；江莱生物；肌酐(CR)批号：231305；江莱生物；尿素氮(BUN)批号：7361；江莱生物。

1.4仪器全自动生化分析仪(OLYMPUS AU2700);电子天平(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司,型号:BSA124S)；离心机(安新县白洋离心机厂,型号:R5型医用低速冷冻离心机)。

1.5实验步骤实验研究之前,所有实验小鼠禁食不禁水,12 h后,将稳心汤的最大给药量予实验研究的小鼠进行灌胃,即最大给药浓度(5.2 g/mL)及最大给药体积(0.7 mL/20 g·次),分别于24 h内分3次进行灌胃。得出最大给药量为425 g/kg,经计算小鼠的最大耐受量倍数71.5(倍),是人用临床剂量159 g/50 kg，生药的120倍左右。每间隔8 h即以同样的剂量给药1次,一共给药3次。对照组给以相同剂量的0.5%羧甲基纤维素钠水溶液。连续观察14 d,细致观察实验研究小鼠的外观、行为、一般状态、呼吸、中毒反应及死亡状况;详细记载实验小鼠的体重及饲料量。实验结束后抽血检测肝肾功能。实验研究中,针对死亡的小鼠,及时进行尸体解剖,肉眼观察脏器病理改变。

表1　补肾降压方对受试动物体重的影响±s)

注:对照组与给药组t检验,*P<0.05,给药前(合计)P>0.05;给药后(合计)P>0.05。

表2　给药2周后小鼠ALT、AST、BUN、Cr的含量

注：对照组与给药组t检验，ALT:P>0.05；AST:P>0.05.BUN：P>0.05；Cr：P>0.05。

2　结果

2.1一般状况所有实验研究的小鼠经灌胃稳心汤后,无震颤、惊厥、流涎、流泪、流涕、呼吸困难、便秘、腹泻等异常生命体征。小鼠外观皮毛光泽。2周内实验研究的小鼠无一死亡。观察2周后,实验研究的小鼠无显著异常。

2.2体重详细记录实验研究的小鼠体重,统计发现,稳心汤对小鼠的体重无影响，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.3肝肾功能2周后摘眼球取血,离心,取血清,检测生化中的ALT、AST、BUN、Cr,经统计发现,差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

3　讨论

稳心汤由如下药物组成：党参15 g、肉桂3 g、麦冬12 g、细辛3 g、赤芍15 g、川芎10 g、莪术9 g，姜黄9 g、全蝎9 g、山楂15 g、大黄6 g后下、炙甘草6 g。方中党参补益心气、养血生津，肉桂温阳补肾、散寒通经，麦冬养阴生津。上药合用，共奏温阳散寒、益气滋阴之功，为扶正治本之法。川芎、赤芍、山楂活血化瘀、行气通阳，莪术、片姜黄破血行气，通经止痛，全蝎通络散结，细辛散寒止痛、温化痰饮，大黄通肠解毒、逐瘀通经，瓜蒌清热化痰、利气宽胸，上药合用，共奏理血行气、通经止痛、通阳化痰之功，为祛邪治标之法。炙甘草补中益气、调和诸药。纵观全方，攻补兼施、标本兼治、寒热并用，具有温阳益气、活血化瘀、化痰通络之功，方证对应，临床使用，颇多效验。

但稳心汤的临床用药安全性需要进一步的探究。急性毒性试验是目前评价临床试验用药安全性的证据之一。本实验为稳心汤系列研究的一部分。旨在研究稳心汤的急性毒理作用，了解其对生存状况，肝肾功能的损害。为将来进入临床运用提供依据，为以后的临床给药做出很好的指导。在本研究中，以稳心汤的最大给药浓度(5.2 g/mL)及最大给药体积(0.7 mL/20 g·次)给予实验研究的小鼠进行灌胃，得出最大给药量为425 g/kg，经计算小鼠的最大耐受量倍数71.5(倍)，是人用临床剂量159 g/50 kg生药的120倍左右。在本研究中，灌胃给药期间，治疗组与对照组在饮水及摄入量方面差异无统计学意义(P>0.05)。另外，我们观察了大鼠的体重及生长状况，并无致死致伤的情况出现，雌性与雄性分别观察，也并无差异。我们又进一步检测了实验研究小鼠的血生化，发现对照组与给药组在肝肾功能方面差异无统计学意义(P>0.05)。研究提示，大剂量稳心汤对实验研究的小鼠肝脏和肾脏没有显著影响。综上可知，稳心汤具有较好的安全性，这进一步为临床运用稳心汤治疗冠心病介入术后阳虚血瘀证提供了重要的临床与实验研究基础，为揭示中医学方证对应的科学内涵提供依据[15]。

[1]段练,熊兴江,王阶.冠心病的治疗性血管新生与活血化瘀[J].中国中西医结合杂志,2013,33(11):1561-1566.

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(2016-03-10收稿责任编辑：张文婷)

Experimental Study of Acute Toxicity of the Wenxin Decoction

Duan Lian, Xiong Xingjiang, Li Jun

(Guang′anmenHospital,ChinaAcademyofChineseMedicalSciences,Beijing100053,China)

Objective: Wenxin Decoction is an effective prescription for unstable angina pectoris after coronary heart disease. The aim of this study was to observe the acute toxicity of the decoction to evaluate its safety. Methods: The maximum administration volume(5.2 g/mL) and the maximum drug concentration (0.7 mL/20 g each time) were administered to mice by three hours in 24 hours and 2 weeks respectively. The appearance, behavior, general state, respiration, toxic reaction and death status of the experimental mice were recorded in detail. The body weight and feeding rate of the surviving mice were also recorded every day. Liver function was examined by blood test after the treatment. Results: No significant acute toxicity reaction was observed 3 times in 1 days in the experimental mice with the maximum dose 425 g/kg. And no abnormality was found in liver and kidney function examine. Conclusion: Wenxin decoction is relatively safe.

Wenxin decoction; Acute toxicity; Mice

国家中医药管理局行业专项(编号:201207001)——“全国中医医疗与临床科研信息共享的推广应用研究”

李军(1971.10—),男,医学博士,主任医师,研究方向：主要从事中西医结合心血管疾病防治和研究,Tel:(010)88001094,E-mail:doctorli1031@163.com

R285.5

A doi：10.3969/j.issn.1673-7202.2016.07.041