陈苗苗，董金杰，杜平

(中农威特生物科技股份有限公司，甘肃 兰州 730046)

低血清培养的BHK21细胞染色体遗传稳定性分析

陈苗苗，董金杰，杜平

(中农威特生物科技股份有限公司，甘肃 兰州 730046)

目的:分析1种商业化的低血清培养基适应BHK21细胞进行传代培养，该细胞染色体的变异稳定性，以判定其质量。方法:采用直接法制取4个代次的BHK21细胞的染色体标本，用常规Giemsa染色，1 000倍光学显微镜下计数中期分裂相染色体数目，求出染色体变异率(%)，并进行核型分析。结果:BHK21为亚二倍体或亚四倍体细胞系，亚二倍体众数为42，亚四倍体细胞众数为72～74，该细胞系染色体的畸变率在各代次所占的比例为0～2%，均较低。结论:用商业化的低血清培养基驯化培养BHK21细胞，逐渐降低培养液中血清含量，进行传代培养，通过选取不同代次细胞的染色体进行核型分析，该细胞系的遗传学特性相对稳定，各代次间无本质差异，可候选为制苗用细胞。

低血清;BHK21细胞;染色体;遗传稳定性

BHK21是源于幼仓鼠肾的一种传代细胞系［1，2］。由于BHK21细胞对口蹄疫病毒敏感，且又是口蹄疫病毒很好的宿主细胞，所以在口蹄疫疫苗生产中，都使用BHK21细胞对口蹄疫病毒进行繁殖。无论是传统的转瓶工艺还是悬浮培养工艺，都以贴壁的BHK21细胞为驯化对象，由权威机构的ATCC保存的BHK21细胞，在其介绍中明确说明，此传代细胞遗传上具有一定的变异性。为了能够保证口蹄疫病毒生产的高效性，保证宿主细胞的遗传稳定性则是重中之重。目前能够检测细胞变异系数的有效方法就是核型分析，这是细胞遗传学及细胞生物学的核心基本技术之一。……