杨 平, 武晓莉, 周轶群, 朱晶晶, 郭 妤, 陈 亮, 杨清建, 卢勇舟, 贾传龙, 刘天一



实验研究

miRNA在皮肤瘢痕组织中的表达研究

杨 平, 武晓莉, 周轶群, 朱晶晶, 郭 妤, 陈 亮, 杨清建, 卢勇舟, 贾传龙, 刘天一

目的 研究正常皮肤组织、非增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中miRNA的表达，筛选对瘢痕异常增生可能发挥作用的miRNA。方法 使用miRNA芯片检测正常皮肤组织(C)、非增生性瘢痕(T1)和瘢痕疙瘩(T2)中miRNA的表达谱，并对各组miRNA进行对比，筛选共同表达但表达有差异的miRNA部分，再选取其中表达差异较为明显的miRNA，对其进行Real-Time quantitative PCR验证实验。结果 共计测得miRNA 2539条，差异表达结果为：T1/C，上调2/下调17；T2/C，上调3/下调94；T2/T1，上调9/下调87。选取差异表达显著的miRNA，从C至T2，miR-100、miR-29a表达呈现下调趋势，而miR-181a、miR-198表达呈现上调趋势。结论 非增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的miRNA表达均有别于正常皮肤组织，而miR-100、miR-29a、miR-181a、miR-198对瘢痕组织内成纤维细胞增殖和胶原合成过程中发挥作用的重要信号通路均有影响。瘢痕增生是多基因复合性表达作用的结果。

miRNA； 正常皮肤组织； 非增生性瘢痕； 瘢痕疙瘩； 瘢痕增生

MicroRNA(miRNA) 是一类小的、内源性的非编码RNAs，主要是通过转录后调控的方式实现对基因表达进行调控。自2013年1月至2015年12月，复旦大学附属华东医院整形美容科对临床获取的正常皮肤组织、非增生性瘢痕和瘢痕疙瘩进行miRNA芯片检测和验证，探讨在瘢痕形成过程中，miRNA表达情况以及miRNA对瘢痕异常增生的部分作用机制。

1 对象与方法

1.1 试剂和仪器设备

TRIzol Reagent、Amino AllylMessageAmpTMⅡ aRNA、Amplification Kit、Trizol (美国INVITROGEN公司)，Mono Cy5 reactive Dye(美国GE公司)，Whole Genome OneArray Microarray(美国PHALANX公司)，RNA酶抑制剂(美国PROMAGE公司)，反转录酶、10×RT缓……