袁选举，王贤和

(湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心,湖北 十堰 442000)



论著

复方苦参注射液对宫颈癌细胞体外放射增敏作用研究

袁选举，王贤和

(湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心,湖北 十堰 442000)

[摘要]目的研究复方苦参注射液对人宫颈癌 Hela 细胞株的体外放射增敏作用并初步探讨其作用机制。方法克隆形成法检测放射增敏作用及给药时序、浓度对细胞存活率的影响； DAPI染色法镜下观察细胞凋亡情况；流式细胞法检测细胞周期分布情况；Western blot法检测bcl-2、bax蛋白表达情况。结果复方苦参注射液与射线单独或联合作用后细胞存活率均较单纯放射组明显降低(P均<0.05)，不同浓度、不同时序处理后细胞存活率比较差异有统计学意义,先照射后给药效果优于先给药后照射(P<0.05)；复方苦参注射液与射线均能使Hela细胞阻滞于G2/M期，联用阻滞效果更加显著(P<0.05)；复方苦参注射液与射线均能破坏细胞核，联用后细胞核皱缩、碎裂更加显著；复方苦参注射液与射线单独及联用均能上调bax蛋白表达(P均<0.05)，下调bcl-2蛋白表达(P均<0.05)。结论复方苦参注射液可通过阻滞宫颈癌Hela细胞周期于G2/M期，下调bcl-2/bax的比值来诱导细胞发生凋亡并增强其对放射线的敏感性。

[关键词]复方苦参注射液;宫颈癌;放射增敏

复方苦参注射液是一种广泛应用于临床、具有广谱抗肿瘤作用的中药制剂[1]，其可通过直接杀伤肿瘤细胞及保护机体免疫功能等途径增强调强放疗和腔内后装对宫颈癌患者的放疗疗效并有效减轻放疗毒副反应[2]，对宫颈癌具有较好的应用前景。但目前有关复方苦参注射液在宫颈癌放疗增敏方面的基础研究报道还较少，为此，笔者在细胞水平上对此进行了研究，旨在为其今后能够更好应用于临床提供理论依据。

1实验资料

1.1试剂与仪器复方苦参注射液购自山西振东金晶药业公司,1 mL含生药0.4 g；噻唑蓝(MTT)购自美国Sigma公司；DAPI购自上海拜力公司；兔抗人bcl-2、bax抗体购自美国Santa Cruz biotechnology公司； Clinac 600C/D加速器(美国Varian公司)；流式细胞仪(美国Beckman Coluter公司)。

1.2实验方法

1.2.1细胞培养、传代及照射人宫颈癌Hela细胞株引自本院临床医学研究所，接种于含10%新生牛血清、100 IU/mL青霉素、100 IU/mL链霉素的1640培养基中，在37 ℃、5%CO2培养箱中培养，每2～3 d传代1次。……