尹鲜思，王少岭，崔益平，陈秋红，王国梁,2，王志龙*

(1.湖南农业大学农学院，湖南 长沙 410128；2.美国俄亥俄州立大学植物病理系，俄亥俄 哥伦布 43210)



抗水稻黑条矮缩病转基因材料的鉴定分析

尹鲜思1，王少岭1，崔益平1，陈秋红1，王国梁1,2，王志龙1*

(1.湖南农业大学农学院，湖南 长沙 410128；2.美国俄亥俄州立大学植物病理系，俄亥俄 哥伦布 43210)

针对水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)的核心粒子外壳蛋白基因(S8)、毒质与非结构蛋白基因(S9)及其嵌合基因(S8&S9)构建了6个RNAi载体，经农杆菌介导转化武陵粳1号获得转基因植株。通过潮霉素溶液浸泡法对转基因植株进行初步筛选，剔除假阳性植株；再通过PCR从DNA水平进行转基因阳性鉴定；进一步通过qRT–PCR 从RNA水平进行转基因表达量分析。选取qRT–PCR表达量高的单拷贝纯系S8后代进行灰飞虱传毒试验，结果表明，含有S8 RNAi片段的转基因水稻材料对RBSDV具有一定抗性。

水稻；水稻黑条矮缩病；转基因株系；RNA干扰；荧光定量PCR

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水稻黑条矮缩病是由水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)引起的一种病毒性病害，发病植株表现为矮化、分蘖增多，叶片短阔、僵直，叶色浓绿，叶脉和茎秆呈蜡白色，渐变为褐色短条瘤状隆起，穗小或不抽穗结实[1–3]。RBSDV的宿主主要有水稻、玉米、小麦等禾本科植株，其传播媒介为灰飞虱和白背飞虱[4–6]。水稻黑条矮缩病20世纪50年代在日本被首次报道[7]，并于1968年大规模暴发，导致粮食减产绝收[8]。20世纪 60年代在中国首次被报道[9–10]。20世纪90年代末以来，在中国南方稻区再次暴发流行，造成水稻大面积减产[11]。……