姚秀林（辽宁省抚顺市疾病预防控制中心，辽宁 抚顺 113006）



实时荧光RT-PCR与细胞培养法在流感病毒检测中的应用效果观察

姚秀林
（辽宁省抚顺市疾病预防控制中心，辽宁 抚顺 113006）

【摘要】目的 分析研究实时荧光逆转录聚合酶链式反应RT-PCR和细胞培养法两种检测方法在流感病毒检测中的应用、及适合的领域。方法 采集2014年10月至2015年3月国家级流感检测哨点医院抚顺市中心医院内科和儿科门诊病例咽拭子样本500份，同时采用实时荧光RT-PCR检测流感病毒核酸，以及采用MDCK进行阳性标本培养，分离流感病毒，比较两种方法的灵敏度以及差异性。结果 在500份样本中，通过荧光RT-PCR检测阳性84份；通过MDCK细胞培养法阳性35份。二者之间的差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 实施荧光RT-PCR在检测流感病毒时快速有效，更适合应急疫情的快速诊断。细胞培养法更适合核实疫情的实验室诊断，通过病毒抗原性和基因特性进行分析，是流感病原学检测的基础。

【关键词】实时荧光RT-PCR；细胞培养法；病毒核酸；MDCK

流感病毒可引起急性呼吸道疾病，具有传染性，俗称流行性感冒。目前流感已经做到了全球监测，但是却仍然无法完全控制，所以，有效的鉴定流感病毒，进行有效分离是监测和临床诊断的基础。本文通过实时荧光RT-PCR［1-2］、MDCK细胞培养法来对流感病毒的检测分离进行分析探讨。

1 资料与方法

1.1标本来源：2014年10月1日至2015年3月31日在国家级流感监测哨点医院抚顺市中心医院内科和儿科门诊就诊患者，每周采集20份流感样病例（体温≥38 ℃，伴咳嗽或咽痛之一者）咽拭子样本，置于MEM采样液中，低温运送至实验室。……