董晓琴　李亚茹　成军　赵鸿

100034 北京大学第一医院感染疾病科(董晓琴、赵鸿)；100015 首都医科大学附属北京地坛医院(李亚茹、成军)



剪接因子SF3a3通过PI3K-Akt信号传导通路调控丙型肝炎病毒的复制

董晓琴李亚茹成军赵鸿

100034 北京大学第一医院感染疾病科(董晓琴、赵鸿)；100015 首都医科大学附属北京地坛医院(李亚茹、成军)

【摘要】目的研究剪接因子SF3a3(Splicing factor 3,subunit 3, SF3a3)在丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus，HCV)复制中的作用并初步探索其机制。 方法以基因2型HCV病毒株(JFH1)感染的Huh7.5.1细胞(肝癌细胞株)为研究平台，用siRNA技术沉默基因SF3表达，72 h后感染JFH1 24 h，用PEG-IFNα-2b(30 IU/ml)处理48 h，用实时荧光定量PCR(RT-PCR)及免疫印迹(Western Blot)技术研究SF3家族成员与HCV 核心蛋白、干扰素信号通路蛋白间的相互作用。结果在mRNA和蛋白表达水平上，特异性siRNA对SF3a3的沉默效果最佳；沉默SF3a3后，HCV核心蛋白表达增强；同等PEG-IFNα-2b压力下，干扰素抗HCV的作用受抑制；而PI3K-Akt总蛋白和磷酸化蛋白表达降低。结论SF3a3可通过下调PI3K-Akt总蛋白和磷酸化蛋白表达，直接和间接促进HCV复制。

【主题词】剪接因子3a3；肝炎，丙型；聚乙烯二醇类；PI3K-Akt通路

Fundprograms:NationalNaturalScienceFoundationofChina(81170386)

全球约有1.85亿人感染丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus，HCV)，每年死于HCV相关的肝硬化、肝癌等的人数超过3.5万[1,2]。借助于宿主细胞中的成分，HCV得以完成其生活周期、合成新的病毒粒子并释放入血。Pre-mRNA经剪接体的加工形成为成熟mRNA。剪接体由小核糖核酸蛋白(smallnuclearribonucleoproteinparticles，snRNPs)和非snRNPs组成[3]。U2型剪接体是哺乳动物的主要剪接体，其中剪接因子3(splicingfactor3，SF3)为其主要组分[4]。研究发现：SF3家族成员(SF3a3、SF3b2、SF3b5、SF3b14)[5]参与了干扰素抗HCV的作用。为进一步研究SF3、HCV复制和PEG-IFNα三者间的相互作用，我们以JFH1(基因2型HCV病毒株)感染的Huh7.5.1细胞(肝癌细胞株)为研究平台，用siRNA技术沉默SF3表达，发现SF3a3可能通过PI3K-Akt通路调控HCV的复制。……