高效液相色谱法测定木糖母液及发酵液中单糖含量
2016-08-07孙蕊王学群李朝阳李洪飞贾鹏禹
孙蕊,王学群,李朝阳,李洪飞,贾鹏禹
(黑龙江八一农垦大学,大庆163319)
高效液相色谱法测定木糖母液及发酵液中单糖含量
孙蕊,王学群,李朝阳,李洪飞,贾鹏禹
(黑龙江八一农垦大学,大庆163319)
建立了木糖母液及其酵母发酵液中葡萄糖和半乳糖含量的高效液相色谱测定方法。测定方法基于铅配位体交换色谱分离模式,色谱分离柱采用Sepax Carbomix Pb-NP5(300×7.8 mm ID,5 μm,8%交联度)色谱柱,柱温75℃;流动相采用超纯水(100%),泵速0.55 mL·min-1;示差折光检测器温度30℃;木糖母液样品采用固相萃取脱色前处理,母液的发酵液样品采用乙腈沉淀蛋白前处理。在最终的方法条件下,葡萄糖和半乳糖组分在25 min内完成基线分离,在0.2~10.0 mg·mL-1浓度范围内呈现良好的线性关系,方法检测限分别为0.124 mg·mL-1和0.115 mg·mL-1。仪器系统简单,方法重现性好,结果准确。
葡萄糖;半乳糖;木糖母液;发酵液;高效液相色谱法
木糖由酸水解玉米芯等天然半纤维素经净化、结晶等工艺制成,一般用做加氢生产木糖醇的初级产品。木糖企业在制得结晶木糖的同时,离心分流出大量木糖结晶后残液(木糖母液),以往母液被廉价出售用于生产焦糖色素[1,6]。近年来,模拟移动床(SMB)色谱分离成为木糖母液中单糖高效回收利用的重要技术[2-5],该技术手段不但可得到高纯木糖,同时可得到高纯、高附加值的阿拉伯糖,现已实现技术转化并达到规模化生产。木糖母液中除了含有木糖和阿拉伯糖以外,还含有葡萄糖和半乳糖等杂糖组分,葡萄糖的存在增加了糖液的黏度,影响料液传质速度[6-7],同时杂糖组分增加了模拟移动色谱分离难度,所以在回收利用木糖母液之前一般采用酵母发酵去除母液中的葡萄糖[6],也有报道有些酵母也可同时去除母液中的半乳糖[8];……
