陈海英 蔡阿明 张趁华

1.福建莆田学院医学院基础医学部，福建 莆田 351100 2.福建莆田学院临床医学院，福建 莆田 351100

CGRP来源于感觉神经，主要分布在骨骺，骨膜及骨髓等骨组织代谢活跃的地方。这些神经肽被认为是间充质细胞包括骨髓干细胞有丝分裂或骨细胞功能的局部调节因子，具备调节骨内微循环、对骨组织双向调控的作用[1]。CGRP是目前已知的作用广泛的内源性舒血管物质，可以减少自由基产生、保护血管内皮细胞、调节免疫反应[2]。束缚应激作为一种非损伤性刺激，能够较好地模拟人类生活中“无法控制”的拥挤、挫折等生活状态，束缚应激对机体各大系统包括骨代谢均产生较大的影响。为模拟人类在生活、工作中处于无法控制的紧张状态而出现的对身心的损害而对动物进行定时和较低强度的束缚，本研究采用特定的束缚工具，应用免疫组化染色观察软骨下骨组织中神经肽CGRP 的阳性表达，深层次探讨CGRP 在束缚应激对骨代谢作用。

1 材料和方法

1.1 大鼠束缚应激模型的建立

束缚应激造模在王逸基础上进行改良[3]，包括束缚固定、孤养以及短时间禁食禁水，其中以束缚为主，制束缚应激模型。绳栓术后孤养。大鼠束缚应激(即将大鼠固定在特定束缚固定笼中，大鼠可自由呼吸但不能活动，每天2 h，分别持续7 d、14 d、21 d。束缚时间在08:00-18:00，不影响大鼠正常的昼夜节律。束缚期间禁食、禁水，尚不影响大鼠机体功能。分组为正常组、束缚A组、束缚B组、束缚C组。

1.2 外周血处理

大鼠麻醉后，心脏取血4 mL，置于EP管(10% 依地酸二钠30 μL，抑肽酶2000U)。……