李果　李厚华　张延龙　辛转霞　　　　魏新翠　　　　唐豆豆

(西北农林科技大学，杨凌，712100)　　　　　　　(济南市学大教育培训学校)　　(西北农林科技大学)



凤丹牡丹ANS(PoANS)基因克隆、特性及表达1)

李果李厚华张延龙辛转霞魏新翠唐豆豆

(西北农林科技大学，杨凌，712100)(济南市学大教育培训学校)(西北农林科技大学)

摘要通过RT-PCR技术，从凤丹牡丹花瓣中克隆出编码ANS基因的cDNA序列，并对其进行生物信息学分析。对不同开花阶段的凤丹花瓣进行实时荧光定量及总花青素质量分数测定，构建原核表达载体PET-28a-ANS，并转化大肠杆菌BL21感受态，经IPTG诱导进行体外表达。结果表明：该序列编码区域共1 065 bp，编码354个氨基酸，其蛋白相对分子质量为40 475.5 ，亚细胞定位为细胞质的可能性最大；表达分析显示，ANS基因表达水平与不同开花时期的总花青素质量分数及花色相关，原核表达得到相对分子质量约为44 000的ANS-His-tag融合蛋白，与预测蛋白大小相一致。

关键词凤丹牡丹；ANS基因；表达分析；原核表达

凤丹牡丹(Paeonia ostii‘feng dan’)是中国传统的药用植物和新兴的油料作物[1]，具有很高的经济价值，同时也是现代观赏牡丹的主要原始亲本之一[2-3]。凤丹花色主要为白色或浅粉色，单瓣花，在栽培演化进程中受其他种或品种群的影响较小[2]。

决定植物组织颜色的花青素(anthocyanidins)是类黄酮代谢途径中的重要产物[4]。花青素合成酶基因(Anthocyanidin synthase)是花青素合成途径中的一个重要基因，它能够催化无色花青素合成有色花青素[5],花青素能够使植物呈现蓝、紫、粉、红等颜色[4]。ANS基因最初通过转座……