鹿茸水溶性蛋白质提取条件的优化及组分1)
2016-08-06赵玉红张立钢张睿
赵玉红 张立钢 张睿
(东北林业大学,哈尔滨,150040) (东北农业大学) (东北林业大学)
鹿茸水溶性蛋白质提取条件的优化及组分1)
赵玉红张立钢张睿
(东北林业大学,哈尔滨,150040)(东北农业大学)(东北林业大学)
摘要以梅花鹿(Cervus nippon Temminck)鹿茸为原料,采用缓冲溶液提取水溶性蛋白质,在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken设计试验优化鹿茸水溶性蛋白质的提取条件,采用Sephadex G-100凝胶层析和SDS-PAGE电泳对提取物组分进行分析。结果表明:鹿茸水溶性蛋白质的最佳提取工艺条件为pH=9.18,料液比1.0 g∶60.4 mL,提取时间5.9 h,在此条件下蛋白提取量为90.84 mg·g-1。采用Sephadex G-100凝胶层析对鹿茸水溶性蛋白质进行分离得到3个吸收峰,经SDS-PAGE电泳测定,其相对分子质量分别为66 000、29 000、14 000。鹿茸水溶性蛋白质主要为小分子蛋白质。
关键词梅花鹿;鹿茸;水溶性蛋白质
梅花鹿鹿茸是梅花鹿(Cervus nippon Temminck)雄鹿密生茸毛的未骨化的幼角[1]。鹿茸作为哺乳动物界唯一存在的可快速重生的组织器官[2-3],其中含有蛋白质、氨基酸、脂肪酸、磷脂、多糖等多种有机成分,还含有人体必需的多种常量和微量元素[1]。鹿茸蛋白占鹿茸总质量的52%以上[4],具有调节免疫、促进伤口愈合、改善性功能、抗疲劳、抗肿瘤、抗炎、抗氧化等多种生物学效应[5-6]。
鹿茸水溶性成分主要包括蛋白质、氨基酸、多糖等,其中蛋白质和多糖是具有生物功能的活性物质。Sui et al.[7]采用生理盐水和pH=4.0、pH=10.0的缓冲溶液对鹿茸中蛋白质进行提取,用STD裂解缓冲液提取其中可溶性蛋白质,并用胰蛋白酶进行酶解,对产物采用RPLC-ESI-MS/MS进行分析,其酸性和碱性缓冲溶液提取蛋白对人脐静脉内皮细胞具有明显增殖效果。……
