花绒寄甲HSP70基因的特征与表达1)
2016-08-06郝春凤王化鹏张正青常勇李孟楼
郝春凤 王化鹏 张正青 常勇 李孟楼
(西北农林科技大学,杨凌,712100)
花绒寄甲HSP70基因的特征与表达1)
郝春凤王化鹏张正青常勇李孟楼
(西北农林科技大学,杨凌,712100)
摘要为阐明热休克蛋白70(HSP70)在花绒寄甲(Dastarcus helophoroides)发育及雌雄成虫抵抗环境胁迫中的作用,利用实时荧光定量PCR技术分析了其在发育阶段和环境胁迫时的表达情况。从花绒寄甲转录组中获得3条HSP70基因,分别命名为D.hHSP69.09、D.hHSP70.11和D.hHSP71.88。发育阶段定量结果显示,3条HSP70在所有发育阶段均有表达,D.hHSP69.09在1龄幼虫期表达量最高;D.hHSP70.11和D.hHSP71.88在雄虫中表达量最高。在检测的成虫组织中,D.hHSP69.09和D.hHSP70.11在卵巢表达量最高;D.hHSP71.88在脂肪体中表达量最高。HSP70基因随温度升高(23 ℃升至44 ℃)、41 ℃下处理时间(0~270 min)延长、氧化剂浓度(0~70 mmol·L-1)的升高表达量先增加后减少,雌雄表达量差异较大。饥饿试验显示,雌雄虫表达模式不同;随饥饿时间延长,雄虫HSP70基因表达量有所降低,雌虫一定时间内有所上升。因此,花绒寄甲HSP70可能与不同发育期的转换、幼虫的蜕皮行为相关; HSP70对温度、氧化和饥饿胁迫的应激敏感程度和表达水平不同,能够有效应对高温、氧化、饥饿等环境胁迫。
关键词花绒寄甲;逆境胁迫;HSP70;实时荧光定量 PCR
花绒寄甲(Dastarcus helophoroides)是多种林木蛀干害虫如栗山天牛(Massicus raddei)、云斑天牛(Batocera horsfieldi)、松褐天牛(Monochamus alternatus)、光肩星天牛(Anoplophora glabripennis)、锈色粒肩天牛(Apriona swainsoni)等最为有效的天敌昆虫[1],其幼虫寄生在天牛末龄幼虫和蛹上[2]。有报道指出,高温等环境胁迫能够显著影响昆虫的存活、发育和生殖[3-4]。花绒寄甲成虫有着相对较长的寿命,人工饲养8 a以上,在自然环境中,由于各种不利环境因素的影响,比如气候变化、生态环境恶化、病原微生物的入侵等,花绒寄甲的寿命往往达不到人工饲养条件下的寿命。……
