王谷仙 严璟

（曲靖医学高等专科学校，云南 曲靖 655011）

对遗传学诊断的分析

王谷仙 严璟

（曲靖医学高等专科学校，云南 曲靖 655011）

近二十年来，分子遗传学的一系列成就，不仅推动了分子生物学和基础医学的发展，而且对遗传疾病的诊断和治疗，也应用了分子遗传学的新技术如分子杂交、内切酶、DNA重组等进行了探索，并获得了有意义的结果。生物遗传的基本单位是基因，其遗传信息贮存在DNA（去氧核糖核酸）分子的碱基序列之中。结构基因就是决定特殊蛋白质遗传密码的DNA的一个片段。

遗传学；诊断

一、运用单细胞双重巢式PCR和MDA技术方法行性连锁遗传病诊断

方法1、提取男女单个淋巴细胞各150例，共300个细胞。随机分成3组，每组男女细胞各50个，双重巢式PCR技术在单细胞水平同时扩增X-类固醇硫酸脂酶基因（steroid sulfatase gene， STS）/Y-假基因和牙釉质基因（Amelogenin，AMEL），对照组用单重巢式PCR技术在单细胞水平分别扩增两基因，比较单、双重巢式PCR技术在单细胞水平的扩增率及性别诊断正确率。2、应用MDA扩增5个单个淋巴细胞和10个单个卵裂球全基因组DNA，1%的琼脂糖电泳检测扩增效率，通过普通PCR即上述巢式PCR的第二轮的PCR条件检测细胞性别来判断扩增产物的均一性。结果1、单重巢式PCR扩增男性细胞STS和AMEL的扩增率和细胞性别诊断的正确率分别是84%、76%和84%、84%；而双重巢式PCR技术同时扩增上述基因的扩增率和性别诊断正确率分别为98%、96%。后者与前两者相比扩增率和性别诊断正确率均明显提高，差异均有统计学意义（P〈0.05、P〈0.01）。2、MDA扩增5个淋巴细胞（3个为男性细胞，2个为女性细胞）全部扩增成功，扩增率100%；……