苗巍男，李　瑞，钟　江，郑兆鑫，刘明秋

(复旦大学 生命科学学院，上海 200438)



含FMDV中和表位的重组病毒颗粒的构建及鉴定

苗巍男，李瑞，钟江，郑兆鑫，刘明秋

(复旦大学 生命科学学院，上海 200438)

摘要：针对FMDV的疫苗研究一直是防控口蹄疫的重点，而病毒样颗粒(VLPs)形式的疫苗因其安全性和近似传统灭活疫苗的良好免疫效果，近年来逐渐成为疫苗研究的一个新方向.本实验利用猪圆环病毒PCV2的衣壳蛋白(CAP)作为载体，分别插入FMDV MYA98毒株的抗原表位组合——VP1蛋白上B细胞表位141～160aa(B)与串联的B细胞和T细胞表位141～160aa-21～40aa-141～160aa(BTB)，构建对应重组杆状病毒，分别命名为reBAC-CAP-B，reBAC-CAP-BTB.将上述病毒颗粒转入Sf9细胞表达，收获重组杆状病毒并再次感染Sf9细胞扩大病毒滴度，获得目的蛋白CAP-B，CAP-BTB，经过SDS-PAGE，Western blot鉴定正确，透射电镜观察到20～30 nm大小的目的颗粒.

关键词:口蹄疫病毒； 猪圆环病毒； 病毒样颗粒； 抗原表位； 杆状病毒-昆虫细胞表达系统

口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease， FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus， FMDV)引起的一种偶蹄类动物所患的急性、热性、高度接触性传染病[1].FMDV属于小RNA病毒科(Picornaviridae)，口蹄疫病毒属(Aphthovirus)，是最小的动物病毒之一.按血清学分类，口蹄疫病毒目前可以分为7种血清型： O、A、C型(欧洲型)，SAT1、2、3型(非洲型)，AsiaⅠ型(亚洲型)；每种血清型内又包含许多亚型[2].不同血清型间不能交叉保护，同一种血清型中不同亚型也有变化，不一定能交叉保护.由于该病传播途径多，传染速度快，并且病毒易变异，已被国际兽医局(OIE)列为A类传染病之首[3]；许多国家尽管投入了大量的人力、物力和财力进行预防和控制，然而该病仍在流行；……