王昌建，邹玖零，何世成，王卫国，唐小明，林　源，鲁杏华，邱立新（.湖南省动物疫病预防控制中心，湖南长沙　4004；.永州市动物疫病预防控制中心，湖南永州 45000）



小反刍兽疫病毒荧光RT-PCR检测方法的建立与应用

王昌建1，邹玖零2，何世成1，王卫国1，唐小明1，林源1，鲁杏华1，邱立新1
（1.湖南省动物疫病预防控制中心，湖南长沙410014；2.永州市动物疫病预防控制中心，湖南永州 425000）

摘要：为建立小反刍兽疫病毒（PPRV）快速荧光RT-PCR检测方法，应用DNAstar软件对来自NCBI上的PPRV N基因序列进行比对分析，在保守区设置引物和探针，经条件优化，建立PPRV荧光RT-PCR检测方法。结果显示，该方法灵敏度高、特异性好、稳定性强，阳性结果与商用试剂盒的检测结果一致。结果表明该方法可用于PPRV的实验室检测。

关键词：小反刍兽疫病毒；荧光RT-PCR；检测

小反刍兽疫（Peste des Petits Ruminants，PPR）又称小反刍兽假性牛瘟，病原为副粘病毒科麻疹病毒属的小反刍兽疫病毒（PPRV）。该病毒主要感染小反刍兽，其中山羊和绵羊最易感，偶有野生动物感染［1］，目前未有人感染的报道。PPR一般发生在多雨、干燥、寒冷季节［2］。羊群发病率一般高达100%，严重时病死率可达100%，轻度发生时，病死率不超过50%［3］。PPRV可以通过直接接触和空气传播［4］。

PPRV基因组为单股负链无节段RNA，有N-PM-F-H-L 6个基因［5］。其中N基因编码N蛋白（核衣壳蛋白）。该蛋白的主要作用是保护病毒免受RNA核糖核酸酶的降解。传统的病毒分离检测方法耗时长，而琼扩实验及ELISA实验，不仅灵敏度低，还无法区分PPRV和牛瘟病毒（RPV）。近年来，荧光RT-PCR分子生物学技术飞速发展，为PPR快速检测提供了可能。……