宋玉财，王　彬，王官晓，李　鹏，刘洪明，于晓云，于小川，徐晓静，王俊卿（. 山东省烟台市动物卫生监督所，山东烟台　64003；. 烟台市牟平区龙泉镇兽医站，山东烟台　64003）



环介导等温扩增技术研究进展

宋玉财1，王彬1，王官晓1，李鹏2，刘洪明1，于晓云1，于小川1，徐晓静1，王俊卿1
（1. 山东省烟台市动物卫生监督所，山东烟台264003；2. 烟台市牟平区龙泉镇兽医站，山东烟台264003）

摘要：环介导等温扩增技术（LAMP）是由Notomi等建立的一种核酸扩增技术。该方法最大的优点是能够在63～65 ℃的等温条件下扩增特定DNA序列，并在30～60 min内观察到结果。LAMP已经成功用于许多病毒的检测，本文主要概述了LAMP技术原理及发展现状。

关键词：环介导等温扩增技术；原理；发展现状

1　LAMP技术原理

1.1LAMP引物相关

LAMP反应需要4条引物，分别针对靶序列上6个不同位置，包括一对外引物F3、B3和一对内引物FIP（Forward inner primer）、BIP（Backward inner primer）。FIP由F1C区和F2区构成，BIP由B1c区和B2区构成［1］。图1为各引物所在位置示意图。

引物设计是LAMP反应成功与否的关键。现在通常使用日本荣研株式会社的在线LAMP引物设计程序Primer Explore（http：//www. primerexplorer.jp/e/）完成设计工作。Tm值、引物末端稳定性、GC含量、二级结构和引物间距等几个方面都会影响到引物的品质。之后的报道证实在添加一对环状引物后，可缩短大约一半的LAMP反应时间。

1.2LAMP反应扩增原理

图1　LAMP引物位置示意图

在LAMP反应的开始，FIP引物中的F2片段首先与模板F2c区互补结合，在Bst DNA聚合酶作用下，由模板链的3’端向5’端延伸，而后F3引物与模板的F3c结合。因为Bst DNA聚合酶具有链置换的功能，沿着F3引物扩增出的新链将之前的互补链置换下来。……