曹建美

(中国科学院上海辰山植物研究中心，上海辰山植物园，上海松江 201602)



双分子荧光互补技术(BiFC)分析玉米MAPK5与bZIP72蛋白的相互作用

曹建美

(中国科学院上海辰山植物研究中心，上海辰山植物园，上海松江 201602)

摘要[目的]分析玉米MAPK5与bZIP72蛋白之间的相互作用。[方法]构建双分子荧光互补表达载体pN-MAPK5和pC-bZIP72，应用基因枪轰击洋葱表皮细胞瞬时表达，在激光共聚焦显微镜下观察MAPK5与bZIP72蛋白相互作用产生的荧光信号。[结果]ZmMAPK5与ZmbZIP72的BiFC融合载体同时轰击洋葱表皮细胞，细胞核中能发出黄色荧光。[结论] ZmMAPK5与ZmbZIP72在植物细胞核内相互作用。

关键词ZmMAPK5；ZmbZIP72；双分子荧光互补(BiFC)；蛋白互作

植物作为固着生物，在长期的进化过程中发展出复杂的信号响应系统来增强自身对各种不利环境条件的抵抗。其中，最保守的信号系统即为MAPK 信号级联系统，它通过一系列的磷酸化作用将胞外刺激信号转导到胞内，保护细胞免受胁迫伤害。典型的MAPK信号转导系统为三级磷酸化传递系统[1]。MAPKKK接受生物的或非生物的刺激，通过2次磷酸化过程将刺激信号逐级放大传递给MAPK，MAPK接收到信号后可能有3种反应[2]：继续停留在细胞质中激活其他蛋白激酶；进入细胞核，与转录因子相互作用，调控转录因子活性；在细胞质中使细胞骨架磷酸化。

转录因子(Transcription factors, TFs)也称反式作用因子，能够与真核基因启动子区域中的顺式作用元件发生特异性相互作用，并对转录有激活或抑制作用。植物转录因子基因家族中研究最多的一类是碱性亮氨酸拉链(basic region/leucine zipper motif, bZIP)类转录因子。……