陆 宁， 陈剑成， 郑郁善

(1.福建农林大学林学院，福建福州 350002；2.福建农林大学艺术园林学院,福建福州 350002)



凹叶厚朴低温胁迫SSH文库的构建及差异基因的表达分析

陆 宁1， 陈剑成1， 郑郁善2*

(1.福建农林大学林学院，福建福州 350002；2.福建农林大学艺术园林学院,福建福州 350002)

摘要[目的]通过凹叶厚朴差减文库的构建及序列分析，找出其主要抗寒相关功能基因。[方法]随机挑选单克隆菌落进行PCR检测，对837个阳性克隆测序后进行拼接得到97个 unigenes，将97个 unigenes在NCBI进行BLAST比对,后进行BLAST2GO功能分类，推定出11个相关基因进行荧光定量PCR。[结果]CHS、APX、TRX、ERF、DREB、LHCB、WRKY、HSP、PP2C、GAPDH 10个基因在凹叶厚朴受到低温侵害时出现差异表达，推断这10个基因在低温时可能表现出防御机制。[结论]该研究为与凹叶厚朴亲缘关系相近的植物抗低温特性遗传育种提供理论基础。

关键词凹叶厚朴;低温胁迫;SSH文库;基因表达量

温度是影响凹叶厚朴生长发育的关键因素, 探寻低温胁迫对凹叶厚朴分子机理的影响具有重要的理论和实践意义。植物为了应对寒冷气候进化形成了具有抗低温能力的遗传特性[1]。当受到低温伤害时植物的抗寒基因才能被诱导表达启动。植物在抵御低温过程中是由多个基因共同参与代谢调控,单个基因无法增加植物的抗寒性[2]。根据抗寒过程中代谢产物的作用归为两类：调控基因和保护基因[3]。调控基因是编码能与操纵序列结合的调控蛋白的基因,能够起到调节保护基因的表达。保护基因转录翻译而成的蛋白及其他代谢产物可以直接起到抗低温的作用[4]。……