齐耀程，邹 禹，许大凤，高正良

(1.安徽省农业科学院烟草研究所，安徽合肥 230031;2.安徽省农业科学院水稻研究所，安徽合肥 230031;3.安徽省农业科学院科技产业处，安徽合肥 230031)



三生烟叶片与烟花的原生质体制备研究

齐耀程1，邹 禹2，许大凤1，高正良3*

(1.安徽省农业科学院烟草研究所，安徽合肥 230031;2.安徽省农业科学院水稻研究所，安徽合肥 230031;3.安徽省农业科学院科技产业处，安徽合肥 230031)

摘要[目的]探讨三生烟叶片及烟花的高质量原生质体制备方法。[方法]通过优化纤维素酶和离析酶浓度配比、酶解时间、渗透调节剂甘露醇浓度等参数，研究三生烟叶片与烟花原生质体的最优制备方法。[结果]三生烟烟叶材料最佳制备条件为1%纤维素酶和0.5%离析酶、甘露醇浓度0.6 mol/L、酶解时间4 h，完整率达88.22%。烟花材料最佳制备条件为0.8%纤维素酶和0.4%离析酶、甘露醇浓度0.7 mol/L、酶解时间2 h，完整率达83.59%。 [结论]三生烟叶片与烟花原生质体由于材料来源不同，酶解条件存在差异，制备时需要针对不同组织材料予以优化。

关键词烟叶；烟花；原生质体；分离纯化；完整率

植物原生质体是由脱去细胞壁，仅由质膜包围的，具有生活力的裸露细胞。植物原生质体应用领域广泛，涉及基因表达调控与定位、与宿主蛋白质相互作用、细胞融合[1-5]，以及克服有性杂交不亲和性、花期不育[6-8]等领域的研究。原生质体可在细胞水平上进行基因重组，特别是细胞器，内含基因控制的农艺性状改良，如线粒体所控制的细胞质雄性不育等性状。……