刘　宏，李　越，刘长晖，刘　超，葛斌文，陈林丽（.广州市刑事科学技术研究所 广东省法医遗传学重点实验室，广东 广州 50030；.无锡中德美联生物科技有限公司，江苏 无锡 474）



24个Y-STR基因座荧光标记复合扩增体系的建立

刘宏1，李越1，刘长晖1，刘超1，葛斌文2，陈林丽2
（1.广州市刑事科学技术研究所 广东省法医遗传学重点实验室，广东 广州 510030；2.无锡中德美联生物科技有限公司，江苏 无锡 214174）

摘要：目的 构建包含24个Y-STR基因座的荧光标记复合扩增体系。方法 选择DYS531、DYS630、DYS622、DYS552、DYS510、DYS449、DYS459a/b、DYS446、DYS443、DYS635、DYS587、DYS527a/b、DYS460、Y-GATA-A10、DYS520、DYS557、DYS522、DYS481、DYS570、DYS385a/b、DYS444 24个Y-STR基因座，构建荧光复合扩增体系。检测该体系的特异性、同一性、灵敏度、扩增均衡性、抗干扰性和准确性，调查其在广东地区人群的基因多样性。结果 建立的复合扩增体系在检测的非人类及女性样本中未发现谱带，同一个体不同组织检测结果一致，0.1ng以上标准品9948可检测获得完整分型结果。常见抑制物中体系内加入120～200μmol/L血红素、1.5～2.0mmol/L钙离子时出现等位基因丢失，对靛蓝、腐殖酸、EDTA具有较强抗干扰性。通过146例无关个体与Yfiler系统平行检测比对，24 Y-STR检测体系分型准确。广东地区人群单倍型多样性（HD）为0.99972，优于Yfiler系统（HD=0.99858）。结论 本研究建立的24个Y-STR基因座荧光标记复合扩增体系法医学应用前景广阔，可用于案件检验、亲权鉴定与Y-STR数据库建设。

关键词：法医遗传学；Y染色体；短串联重复序列；荧光复合扩增

荧光标记复合扩增检验是目前应用最广泛的检验技术之一［1］，基于这一技术开发的各种商品化试剂盒，如PowerPlex®Y试剂盒与AmpFeSTR®Yfiler®试剂盒（简称Yfiler试剂盒）等，已经在法医DNA检验中得到了广泛应用［2］。……