华 骏,杨 帆,李碧玲,赵世光

(安徽工程大学生物与化学工程学院,安徽芜湖 241000)



毕赤酵母产β-葡萄糖苷酶发酵条件优化

华 骏,杨 帆,李碧玲,赵世光∗

(安徽工程大学生物与化学工程学院,安徽芜湖 241000)

摘要:采用数理统计法对毕赤酵母产β-葡萄糖苷酶发酵条件进行优化研究．以单因素实验确定甘油、甲醇、初始p H为影响酶活的主要因素,通过响应面实验设计对产酶条件进行优化,得到毕赤酵母产β-葡萄糖苷酶最佳发酵条件:甘油浓度19．4 m L/L、硫酸铵质量浓度15 g/L、初始p H 6．12、甲醇浓度2%、装液量20 m L,β-葡萄糖苷酶酶活达到31．87 U/m L,比优化前提高了162．74%．

关 键 词:毕赤酵母;β-葡萄糖苷酶;发酵条件;响应面法

β-葡萄糖苷酶(EC3．2．1．21)又称β-D-葡萄糖苷水解酶,能催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖[1]．β-葡萄糖苷酶能将果、蔬、茶中的风味前体物质水解为具有浓郁天然风味的香气物质,可增加酒类和果汁产品中的风味物质含量,广泛应用于食品、饮料的增香[2]．

β-葡萄糖苷酶产生菌类群广泛分布于原核、真核、古细菌界等几十个属,有上百种之多[3]．目前对β-葡萄糖苷酶产生菌研究较多的是丝状真菌中的曲霉属和木霉属、细菌中的芽抱杆菌属．毕赤酵母表达系统作为一种真核表达系统,克服了传统表达系统如E．coli等表达外源蛋白过程中易形成不溶性包涵体、表达量低的缺陷．前期研究中已构建了一株产β-葡萄糖苷酶产酶的重组毕赤酵母,实现了β-葡萄糖苷酶的异源表达,但其产酶能力较低,亟……