刘超，刘乙蒙，栾治东，任丽莉，孟智超，肖建英

(1.辽宁医学院 基础医学院 发育生物学教研室，辽宁 锦州 121001；2. 辽宁医学院 基础医学院 神经生物学教研室，辽宁 锦州 121001；3. 辽宁医学院 基础医学实验教学中心，辽宁 锦州 121001；4. 辽宁医学院教务处，辽宁 锦州 121001)

酵母双杂交技术筛选与蛋白激酶Wee1相互作用的蛋白

刘超1，刘乙蒙1，栾治东1，任丽莉2，孟智超3，肖建英4Δ

(1.辽宁医学院 基础医学院 发育生物学教研室，辽宁 锦州 121001；2. 辽宁医学院 基础医学院 神经生物学教研室，辽宁 锦州 121001；3. 辽宁医学院 基础医学实验教学中心，辽宁 锦州 121001；4. 辽宁医学院教务处，辽宁 锦州 121001)

目的 应用酵母双杂交技术筛选出与Wee1蛋白激酶相互作用的候选分子，为进一步研究Wee1 的分子功能提供理论基础。方法 利用分子克隆的方法重组酵母双杂交质粒 pGBKT7-Wee1，并验证其在酵母中的毒性、自激活能力和表达。利用酵母双杂交技术从人卵巢cDNA文库中筛选出与Wee1蛋白相互作用的蛋白，并在酵母中重新验证其相互作用。结果 成功构建 pGBKT7-Wee1诱饵质粒，验证了其无毒性及自激活能力，且可以在酵母中表达，可进一步进行酵母双杂交的筛选工作。结论 利用酵母双杂交系统筛选出与Wee1相互作用的候选分子30个，为揭示蛋白激酶Wee1可能通过与其他蛋白相互作用进而调控细胞周期进程。

Wee1；酵母双杂交；蛋白互作

成熟促进因子(mature promoting factor，MPF)是真核生物细胞周期进程中一个关键的调节因子，在减数分裂和有丝分裂细胞周期调控中起着重要作用，可作为细胞周期调控中整合信号的中心枢纽[1-2]。……